羟基磷灰石与骨髓基质细胞自体皮下成骨实验

目的 :观察rhBMP2 /TGF - β对羟基磷灰石与骨髓基质细胞在自体皮下成骨能力的影响。 方法 :应用矿化条件培养液体外培养成年新西兰兔的骨髓基质细胞 ,收集细胞并以 5× 10 6/mL浓度分成 4组 ,A组加入rhBMP2(10 μg) /TGF - β(2 0ng) ,B组加入rhBMP2 (10 μg) ,C组不加生长因子作为对照 ,然后将细胞接种在羟基磷灰石上 ,体外培养 3d ,D组细胞不接种材料上 ,继续体外培养。组织化学方法检测检测磷酸酶 ,扫描电镜观察细胞在材料上的附着情况。将复合物埋植于新西兰兔自体皮下。 4周后常规HE染色、免疫组织化学染色并进行图像分析观察Ⅰ型胶原、骨形成蛋白合成情况。结果 :A、B组的碱性磷酸酶平均OD值显著高于C组 (P <0 .0 1)。细胞接种在材料 3d后 ,各组材料表面均见大量多边形的细胞附着。复合物植入皮下 4周时HE染色见各组均有条索状骨基质形成 ,A、B组Ⅰ型胶原平均灰度值明显低于C组 (P <0 .0 1=,各组骨形成蛋白的表达无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :羟基磷灰石与骨髓基质细胞在自体皮下能够形成骨组织 ,rhBMP2 /TGF - β较rhBMP2 有更强的促进骨形成作用

Heterotopic Osteogenesis of Autogenous Marrow Stromal Cells on Hydroxyapatite Scaffold.