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不同年龄大鼠骨髓源性心肌干细胞生物学特性的比较
引用本文:王存,谭玉珍,王海杰,国海东,张大勇,崔晓军. 不同年龄大鼠骨髓源性心肌干细胞生物学特性的比较[J]. 解剖学报, 2009, 40(4): 573-577. DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2009.04.011
作者姓名:王存  谭玉珍  王海杰  国海东  张大勇  崔晓军
作者单位:复旦大学上海医学院人体解剖学与组织胚胎学系,上海 200032
基金项目:国家自然科学基金资助项目,高等学校博士点专项科研基金 
摘    要:目的 研究不同年龄大鼠骨髓源性心肌干细胞(MCSCs)形态和衰老相关指标的差异,探讨年龄因素对MCSCs增殖、存活和向心肌细胞分化的影响. 方法 利用单细胞克隆培养技术从幼年、成年和老年雄性SD大鼠骨髓中筛选MCSCs,透射电镜下观察细胞超微结构改变.SA-β-半乳糖苷酶染色和活性氧(ROS)染色检测细胞衰老变化,流式细胞术分析细胞周期分布.Annexin V/PI双标流式细胞术和Hochest33342染色检测细胞存活和凋亡.用骨形态发生蛋白-2(BMP-2)诱导不同年龄组MCSCs向心肌细胞分化,通过RT-PCR检测诱导后心肌早期转录因子和心肌特异基因的表达,并通过免疫细胞化学染色检测各年龄组细胞经(BMP-2)诱导后细胞内心肌特异性肌钙蛋T(cTnT)表达的变化. 结果 老年组MCSCs核质比减小,胞质内可见髓样小体.随着年龄增长,处于增殖期的MCSCs比例下降,β-半乳糖苷酶和ROS阳性细胞数目增多.老年组存活细胞比例较幼年组降低.用BMP-2诱导后4周,幼年组细胞的Nkx2.5、GATA-4和cTnT、Cx-43 mRNA表达明显,成年组和老年组细胞表达低于幼年组,差异有显著性意义.免疫细胞化学染色显示,BMP-2诱导后幼年组细胞cTnT表达明显,老年组细胞表达较弱. 结论 随着年龄增长MCSCs发生衰老变化,其增殖、存活和向心肌细胞分化能力逐渐下降.

关 键 词:骨髓源性心肌干细胞  衰老  骨形态发生蛋白-2  细胞分化  β-半乳糖苷酶  活性氧  流式细胞术
收稿时间:2009-02-02

Comparative study on biological characteristics of marrow-derived cardiac stem cells from rats at different Ages
WANG Cun,TAN Yu-zhen,WANG Hai-jie,GUO Hai-dong,ZHANG Da-yong,CUI Xiao-jun. Comparative study on biological characteristics of marrow-derived cardiac stem cells from rats at different Ages[J]. Acta Anatomica Sinica, 2009, 40(4): 573-577. DOI: 10.3969/j.issn.0529-1356.2009.04.011
Authors:WANG Cun  TAN Yu-zhen  WANG Hai-jie  GUO Hai-dong  ZHANG Da-yong  CUI Xiao-jun
Affiliation:Department of Anatomy and Histology and Embryology, Shanghai Medical School of Fudan University, Shanghai 200032, China
Abstract:
Keywords:Marrow-derived cardiac stem cells  Aging  BMP-2  Cell differentiation  Reactive oxygen species  Flow cytometry
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