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半夏曲中4种优势微生物的荧光定量PCR方法的建立
引用本文:郭佳佳,王立元,翁美芝,谢卫华,龙凯,苏明声,杨明,谢小梅.半夏曲中4种优势微生物的荧光定量PCR方法的建立[J].中草药,2017,48(24):5130-5135.
作者姓名:郭佳佳  王立元  翁美芝  谢卫华  龙凯  苏明声  杨明  谢小梅
作者单位:江西中医药大学 现代中药制剂教育部重点实验室, 江西 南昌 330004,江西中医药大学基础医学院, 江西 南昌 330004,江西中医药大学基础医学院, 江西 南昌 330004,江西中医药大学药学院, 江西 南昌 330004,江西中医药大学药学院, 江西 南昌 330004,江西中医药大学 现代中药制剂教育部重点实验室, 江西 南昌 330004,江西中医药大学 现代中药制剂教育部重点实验室, 江西 南昌 330004,江西中医药大学 现代中药制剂教育部重点实验室, 江西 南昌 330004
基金项目:国家中医药管理局2015年中医药行业科研专项(201507004-03)
摘    要:目的对半夏曲中4种优势微生物建立快速、有效的荧光定量PCR检测方法。方法以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis、宛氏拟青霉Paecilomyces variotii、丝衣霉菌Byssochlamys spectabilis、黑曲霉Aspergillus niger的重组质粒为标准质粒,设计特异性引物并进行特异性、灵敏性及重复性实验。结果 4种优势微生物的熔解曲线峰单一。枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉的最低检测限度分别为584、622、0.272、500拷贝/μL。不同质量浓度的标准质粒变异系数(CV)均小于5%。结论建立的枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉的荧光定量PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点,可用于发酵类中药中微生物的检测及定量。

关 键 词:枯草芽孢杆菌  宛氏拟青霉  丝衣霉菌  黑曲霉  荧光定量PCR  SYBR  Green  I
收稿时间:2017/6/13 0:00:00

Establishment of fluorescent quantitative PCR method for four dominant microorganisms in Rhizoma Pinelliae fermentata
GUO Jia-ji,WANG Li-yuan,WENG Mei-zhi,XIE Wei-hu,LONG Kai,SU Ming-sheng,YANG Ming and XIE Xiao-mei.Establishment of fluorescent quantitative PCR method for four dominant microorganisms in Rhizoma Pinelliae fermentata[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2017,48(24):5130-5135.
Authors:GUO Jia-ji  WANG Li-yuan  WENG Mei-zhi  XIE Wei-hu  LONG Kai  SU Ming-sheng  YANG Ming and XIE Xiao-mei
Institution:Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Key Laboratory of Modern Preparation of TCM, Ministry of Education, Nanchang 330004, China,School of Basic Medicine, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China,School of Basic Medicine, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China,School of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China,School of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China,Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Key Laboratory of Modern Preparation of TCM, Ministry of Education, Nanchang 330004, China,Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Key Laboratory of Modern Preparation of TCM, Ministry of Education, Nanchang 330004, China and Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Key Laboratory of Modern Preparation of TCM, Ministry of Education, Nanchang 330004, China
Abstract:
Keywords:Bacillus subtilis  Paecilomyces variotii  Byssochlamys spectabilis  Aspergillus niger  fluorescence quantitative PCR  SYBR Green I
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