B弱亚型表达调控的分子机制研究

目的 研究B抗原减弱血液标本的血清学特性和抗原表达减弱的分子机制.方法 选择2007年1月至2010年12月于本中心行常规ABO血型检测样本中,B抗原表达减弱的血液样本10份作为研究对象,纳入研究组；计算机随机选择5份正常B表现型的血液样本作为对照组.采用经典血清学技术检测红细胞ABO血型,聚合酶链反应(PCR)技术扩增ABO基因全部外显子序列和5’端调控(CBF/NF-Y增强子)序列,并进行测序分析,应用逆转录-PCR(RT-PCR)技术分析ABO cDNA转录剪接情况,采用重亚硫酸盐转化和克隆测序法分析ABO基因启动子区CpG岛甲基化水平.结果 研究组标本的血清学表现为B抗原明显减弱,全部外显子编码序列和拼接位点碱基无任何突变.ABO基因增强子未发现异常,存在着ABO基因全长cDNA转录本,未发现新的转录剪接体.与对照组比较,研究组10份标本在启动子区CpG岛均呈现不同程度的甲基化,其中6个标本在nt-26序列位点表现半甲基化状态.结论 ABO基因启动子区CpG岛中的甲基化位点可能是引起B抗原弱表达的原因.

Molecular Mechanism of Expression Regulatory in B Weak Subgroup