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携带人白细胞介素18基因的复制缺陷型腺病毒载体的构建、鉴定和滴度测定
引用本文:毛立军,郑骏年,郑典宝,郝林,郑宏祥,裴东生.携带人白细胞介素18基因的复制缺陷型腺病毒载体的构建、鉴定和滴度测定[J].徐州医学院学报,2006,26(2):95-97.
作者姓名:毛立军  郑骏年  郑典宝  郝林  郑宏祥  裴东生
作者单位:1. 徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,徐州,221002
2. 徐州医学院生物化学与分子生物学中心,江苏,徐州,221002
摘    要:目的构建人白细胞介素18(IL-18)基因复制缺陷型腺病毒表达载体。方法以质粒pJWIL—18为模板,设计并合成上、下游引物,利用多聚酶链反应(PCR)扩增获得IL-18基因片段,酶切后克隆至pCA13质粒,构建重组质粒pCA13IL—18。鉴定正确后,将pCA13 IL—18与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染HEK293细胞,9-12天出现病毒空斑。提取重组腺病毒的DNA。进行PCR鉴定。大量扩增后,氯化铯梯度离心纯化腺病毒,测病毒滴度。结果酶切分析、序列测定、PCR验证表明,IL-18基因成功克隆到复制缺陷型腺病毒载体中。结论成功构建了表达人IL-18基因的复制缺陷性腺病毒载体。

关 键 词:白细胞介素18  腺病毒载体
文章编号:1000-2065(2006)02-0095-03
收稿时间:12 15 2005 12:00AM
修稿时间:2005-12-152006-02-26

Construction and identification of replication - deficient recombinant adenovirus vector expressing IL- 18 gene
MAO Li - jun, ZHENG Jun - nian, ZHENG Dian - bao, et al.Construction and identification of replication - deficient recombinant adenovirus vector expressing IL- 18 gene[J].Acta Academiae Medicinae Xuzhou,2006,26(2):95-97.
Authors:MAO Li - jun  ZHENG Jun - nian  ZHENG Dian - bao  
Affiliation:Department of Urosurgery, Affiliated Hospital of Xuzhou Medical College, Xuzhou, Jiangsu 221002, China
Abstract:
Keywords:interleukin- 18  aclenovirus vector
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