| 摘 要： | 目的:明确支气管哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征(ashma-COPD overlap syndrome,ACOS)患者与健康体检者Th17、Treg细胞之间的差异性;明确Th17、Treg细胞与ACOS的关系;明确金匮肾气丸是否对ACOS患者Th17、Treg细胞失衡产生作用。方法:ACOS患者和健康体检者血液标本离心收集血清,Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),PBMC体外培养,加入相应抗体后,Th17、Treg细胞表面染色,以CD4+IL-17A+、CD4+CD25+Foxp3+荧光阳性细胞分别标示Th17和Treg细胞,流式细胞仪检测ACOS组和阴性对照组的细胞因子表达,将分离的人PBMC细胞接种于包被CD3抗体的培养板,并用2ug/ml的可溶性CD28抗体刺激其活化扩增,根据实验分组在含药血清组分别加入大鼠给药组的5%、10%、15%、20%金匮肾气丸含药血清,空白对照组加入大鼠空白组的血清,刺激培养72h后收集样本进行后续检测。结果:ACOS组CD25+Foxp3标记的细胞比例低于阴性对照组,而CD4+IL-17A+标记的细胞比例明显高于阴性对照组,使用金匮肾气丸干预后,金匮肾气丸含药血清组CD4+IL-17A+标记的细胞比例显著低于空白对照组;CD25+Foxp3标记的细胞比例显著高于空白对照组,与含药血清浓度相关性较大。结论:ACOS组中Th17细胞的表达水平明显高于阴性对照组,Treg细胞的表达水平显著低于阴性对照组,使用金匮肾气丸含药血清干预后,含药血清组Th17细胞因子的表达水平显著低于空白对照组,Treg细胞因子的表达水平显著高于空白对照组,说明金匮肾气丸可纠正Th17、Treg细胞水平失衡。
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