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温郁金SRAP-PCR反应体系建立及条件优化
引用本文:王晓慧,吴亮,姜程曦. 温郁金SRAP-PCR反应体系建立及条件优化[J]. 中草药, 2016, 47(14): 2515-2518
作者姓名:王晓慧  吴亮  姜程曦
作者单位:吉林省农业科学院 农业资源与环境研究所, 吉林 长春 130033;温州医科大学药学院, 浙江 温州 325035;温州医科大学药学院, 浙江 温州 325035;温州医科大学药学院, 浙江 温州 325035
基金项目:国家“十二五”科技支撑计划(2011BAI04B04);浙江省自然科学基金资助项目(LY15H280014);云南大理药业股份有限公司课题(KJHX1603)
摘    要:目的研究温郁金Curcuma wenyujin的SRAP-PCR扩增体系最适宜的条件。方法以提取纯化温郁金基因组DNA为模板,利用PCR扩增技术,对SRAP反应中主要影响因素Mg2+浓度、d NTP浓度、模板DNA质量浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度进行优化。结果根据实验确定的最佳体系为25μL SRAP反应体系,其中Mg2+2.0 mmol/L,Taq聚合酶2.0 U,引物浓度1.6μmol/L,模板DNA 0.4 ng/μL,d NTP 2.0 mmol/L,10×PCR缓冲液2.5μL。结论通过扩增条件优化实验,扩增的产物条带清晰明亮、重复性好,确定的反应体系及反应程序适用于温郁金的SRAP分子标记,为今后温郁金的遗传多样性研究奠定了基础。

关 键 词:温郁金  基因组DNA  SRAP-PCR反应体系  SRAP分子标记  遗传多样性
收稿时间:2016-06-01

Optimization of SRAP-PCR reaction systems for Curcuma wenyujin
WANG Xiao-hui,WU Liang and JIANG Cheng-xi. Optimization of SRAP-PCR reaction systems for Curcuma wenyujin[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016, 47(14): 2515-2518
Authors:WANG Xiao-hui  WU Liang  JIANG Cheng-xi
Affiliation:Institute of Agricultural Resources and Environment, Jilin Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130033, China;School of Pharmaceutical Science, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325035, China;School of Pharmaceutical Science, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325035, China;School of Pharmaceutical Science, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325035, China
Abstract:
Keywords:Curcuma wenyujin Y. H. Chen et C. Ling  genomic DNA  SRAP-PCR reation system  SRAP molecular markers  genetic diversity
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