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键合β-环糊精琼脂凝胶微球分离纯化大豆苷元及其色谱机制研究
引用本文:吕述权,石国宗,许远杰,唐博文,王锌源,潘启胜,邓美健.键合β-环糊精琼脂凝胶微球分离纯化大豆苷元及其色谱机制研究[J].中草药,2016,47(15):2627-2634.
作者姓名:吕述权  石国宗  许远杰  唐博文  王锌源  潘启胜  邓美健
作者单位:厦门蓝湾科技有限公司, 福建 厦门 361000;厦门蓝湾科技有限公司, 福建 厦门 361000;厦门蓝湾科技有限公司, 福建 厦门 361000;厦门大学药学院, 福建 厦门 361102;厦门蓝湾科技有限公司, 福建 厦门 361000;厦门蓝湾科技有限公司, 福建 厦门 361000;厦门蓝湾科技有限公司, 福建 厦门 361000
基金项目:厦门市海洋经济创新发展区域示范项目(13CZP004SF27)
摘    要:目的通过制备键合β-环糊精琼脂凝胶微球(AG-β-CD)作为分离介质,对大豆异黄酮粗品中大豆苷元进行高效分离纯化。方法利用琼脂为原料,通过乳化、交联并键合功能基团β-环糊精(β-CD)制备AG-β-CD;将其作为一种分离介质,通过考察流动相、洗脱体积流量和微球负载量3个方面,确定AG-β-CD分离纯化大豆苷元的工艺并进行验证,质谱和核磁共振鉴定其结构;通过与其他2种黄酮类物质表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和葛根素在C18反相柱色谱保留行为比较,结合auto DOCK4.0进行分子模拟,以及流动相乙腈体积分数变化对3种黄酮类物质在AG-β-CD固定相上的保留时间的变化曲线证明其色谱机制。结果大豆异黄酮粗品中主要成分为大豆苷元(57.14%),AG-β-CD的负载量为1.33 mg/m L(大豆异黄酮粗品总量/柱体积),体积流量为2 BV/h时,通过20%乙醇洗脱2 BV、40%乙醇洗脱1.33 BV、70%乙醇洗脱6~7 BV,得到质量分数≥95%(平均质量分数96.98%)的大豆苷元,收率为97.86%。色谱机制实验表明AG-β-CD具有亲水和反相双重保留与分离作用。结论 AG-β-CD能够高效地分离纯化大豆苷元。

关 键 词:琼脂凝胶微球  β-环糊精  大豆苷元  亲水作用色谱  反相作用色谱  分离纯化  大豆异黄酮
收稿时间:2/1/2016 12:00:00 AM
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