IL-1β诱导支气管上皮细胞高迁移率族蛋白1主动释放

目的：研究IL‐1β对健康人支气管上皮细胞（HBE）高迁移率族蛋白1（HMGB1）表达和释放的影响。方法培养HBE135‐E6E7，四唑盐（MTT）法检测不同浓度IL‐1β对支气管上皮细胞活力的影响，荧光定量PCR检测IL‐1β刺激HBE后HMGB1mRNA表达，双抗体夹心ELISA法检测细胞上清液中HMGB1水平，蛋白免疫印迹方法检测IL‐1β刺激HBE总蛋白、胞核、胞质HMGB1表达。免疫荧光观察IL‐1β刺激后对HBEHMGB1的移位的影响。结果0．1、1．0、10．0ng／mLIL‐1β刺激HBE24h对其活力无影响。IL‐1β以浓度和时间依赖性方式刺激HBE的HMGB1mRNA水平升高，IL‐1β增加HBE的HMGB1蛋白表达水平。在浓度依赖性实验，与对照组比较，1．0、10．0ng／mLIL‐1β刺激HBE24h后培养上清液HMGB1水平显著增加；在时间依赖性实验中，与对照组比较，10．0ng／mLIL‐1β刺激HBE12h、24h后细胞上清液中的HMGB1显著升高（P＜0．05）；10．0ng／mLIL‐1β刺激HBE24h后，HBE胞质蛋白明显增加，胞核蛋白减少。免疫荧光检测显示，HMGB1主要表达正常HBE的细胞核内，少量分布于细胞质，IL‐1β（10．0ng／mL）刺激HBE24h，HMGB1明显从HBE胞核向胞质转位。结论IL‐1β可以显著诱导支气管上皮细胞HMGB1的表达和主动释放，提示HMGB1可能参与了IL‐1β介导慢性气道炎症过程。