| 摘 要： | 目的观察不同剂量晚期糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)对体外分离培养的人骨髓间充质干细胞增殖、凋亡及氧化应激的影响,为临床上提高干细胞移植治疗糖尿病心肌病后供体干细胞的存活率提供新的依据。方法采用全骨髓法从人的骨髓标本中分离培养骨髓间充质干细胞,以含10%FCS的L-DMEM培养细胞,0.25%的胰酶消化后按1∶2比例传代接种培养,对P3代细胞应用流式细胞仪检测细胞表面标志CD44、CD105和CD34。在骨髓间充质干细胞中加入不同浓度的AGE-BSA,作用24 h后加入CCK-8溶液,37℃、5%CO2培养箱培养1 h,用酶标仪在450 nm处测定吸光度值。采用Annexin V/PI双染法进行染色,避光作用20 min后,将细胞置于流式细胞仪上检测细胞凋亡百分率。同时对细胞内活性氧水平进行测定,并且测定细胞内丙二醛的含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果传代后的骨髓间充质干细胞呈鱼群样或漩涡状排列,细胞为长梭形,贴壁紧密,形态较为一致。细胞表面标志CD105(间充质干细胞相对特异性标志)及CD44(黏附分子,基质细胞表达)呈阳性表达,阳性率分别达98.9%和97.8%;CD34(造血干细胞/祖细胞及内...
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