萝卜硫素对小鼠放射性肺损伤的防护作用机制

目的 探讨萝卜硫素（sulforaphane，SF）对小鼠急性放射性肺损伤的防护作用及其机制。方法 40只雌性C57BL/6J小鼠，按随机数字表法分为健康对照组、单纯照射组、照射+SF 3 mg/kg 组、照射+SF 5 mg/kg 组、照射+SF 10 mg/kg 组，每组8只。以6 MV X射线全肺单次12 Gy照射，各给药组自照射前7 d开始至照射后7 d，隔天腹腔注射不同浓度的SF，健康对照组和单纯照射组注射同等剂量的二甲基亚砜溶剂（DMSO+生理盐水）。照后14 d，留取小鼠肺组织标本，HE染色观察病理改变，免疫组织化学法观察NLRP3的定位与表达，ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α、TGF-β1表达水平，实时荧光定量反转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测肺组织中NLRP3、IL-1β mRNA的表达，Western blot检测NF-κB p65、NLRP3、IL-1β蛋白表达，凝胶迁移实验（EMSA）检测NF-κB活性。结果 HE染色结果显示，各照射+SF组与单纯照射组比较，肺组织急性炎性反应减轻。肺组织中NLRP3表达下降，照射+SF 10 mg/kg组NLRP3降低显著（F=42.750，P<0.05）。支气管肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α、TGF-β1水平下降（t_IL-6=-62.65~-21.00，t_TNF-α=-32.18~-16.57，t_TGF-β1=-58.22~-46.11，P<0.05）。肺组织NLRP3和IL-1β mRNA表达显著下降（t_NLRP3=-6.56~-5.68，t_IL-1β=-29.75~-21.20，P<0.05）。NF-κB p65、NLRP3、IL-1β蛋白表达下降（t_{NF-κB p65}=-34.00~-1.71，t_NLRP3=-25.01~-16.91，t_IL-1β=-73.70~-55.14，P<0.05），其中NF-κB p65、NLRP3相对表达量和SF呈剂量依赖性降低（r=0.945、0.926）。EMSA结果显示，NF-κB活性下降，且和SF呈剂量依赖性降低（t_NF-κB=-38.68、-614.82、-2 831.40，P<0.05）。结论 萝卜硫素可通过降低小鼠肺组织NLRP3表达，有效地降低炎性因子的表达，减轻辐射诱导的炎症反应，对放射性肺损伤具有防护作用。

Mechanism of protective effect of sulforaphane against radiation-induced lung injury in mice