聚合酶链反应-反向点杂交法检测遗传性耳聋相关基因的热点突变

目的探讨聚合酶链反应-反向点杂交(PCR-RDB)法对遗传性耳聋相关基因突变检测的准确性和实用性。 方法选择2014年1月至2016年10月，于广东省妇幼保健院临床诊断为非综合征型耳聋(NSHI)的250例患者为研究对象。采用PCR-RDB法检测其外周血遗传性耳聋相关基因突变。PCR-RDB法采用遗传性耳聋基因芯片检测试剂盒，可检测中国人群常见的4个耳聋相关基因的12个热点突变，即GJB2(35del G、176_191del 16、235del C、299_300del AT)，GJB3(538C>T)，SLC26A4(1174A>T、1226G>A、1229C>T、IVS7-2A>G、2168A>G)及线粒体MTRNR1(1494C>T、1555A>G)。同时，所有DNA样本均采用金标准Sanger测序法进行对比验证。本研究符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》，并征得受试者知情同意。 结果①本研究来自250例受试者的250例DNA样本中，耳聋相关基因突变检出率为51.6%(129/250)，其中GJB2基因突变检出率为28.4%(71/250)，SLC26A4基因突变为19.2%(48/250)，线粒体MTRNR1基因突变为4.4%(11/250)，GJB3基因突变为2.0%(5/250)；129例检出的耳聋相关基因突变中，符合遗传病致病特征的耳聋相关基因突变的几率为86.8%(112/129)。②PCR-RDB法与Sanger测序法，对12个耳聋相关基因热点突变的检测结果均相同。③PCR-RDB法检测12个耳聋相关基因热点突变的灵敏度、特异度、总一致性、阳性预测值及阴性预测值均为100.0%。 结论虽然PCR-RDB法检测耳聋相关基因突变的结果与金标准Sanger测序法一致，但是本研究样本量尚小，因此是否可满足临床对遗传性耳聋基因检测的需求，则需多中心、大样本随机对照试验进一步研究、证实。

Detection of gene hot spots mutation in genetic deafness associated gene by polymerase chain reaction-reverse dot blot technique