染料木素对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用及CaM-CaMKIV信号通路的影响

染料木素是一种异黄酮类化合物,被称为植物雌激素,对心血管疾病、肿瘤、绝经后相关妇科疾病等都有较好的临床疗效,在阿尔茨海默病(AD)的防治上具有潜力。该实验通过观察染料木素对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用及CaMCaMKIV信号通路的影响,探讨染料木素对AD的神经保护作用机制。体外培养PC12细胞,MTT法筛选染料木素安全浓度和Aβ_(25-35)的造模浓度和最佳给药时间。预先给予不同浓度染料木素(25,50,100μmol·L~(-1))处理PC12细胞后,以Aβ_(25-35)建立AD细胞模型。采用MTT法检测染料木素对AD细胞模型细胞存活率的影响,倒置显微镜观察细胞形态的改变,AO/EB荧光染色观察细胞的凋亡情况,观察染料木素对AD细胞模型的神经保护作用并确定染料木素最佳给药浓度,qRT-PCR和Western blot法检测细胞中CaM,CaMKK,CaMKIV,tau的mRNA和蛋白表达。结果显示,和空白组相比,AD模型组细胞存活率明显下降,细胞损伤增加,凋亡细胞增多,CaM,CaMKK,CaMKIV,tau的mRNA含量和蛋白表达明显升高,而染料木素可明显提高AD细胞模型的细胞存活率,减少AD细胞模型的细胞损伤和细胞凋亡,显著下调AD细胞模型中CaM,CaMKK,CaMKIV,tau的mRNA含量和蛋白表达。结果表明染料木素对Aβ_(25-35)诱导的AD细胞模型具有明显的神经保护作用,其作用机制可能与下调CaM-CaMKIV信号通路及其下游tau蛋白的表达有关。