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| 人大麻素受体启动子真核报告质粒的构建及活性分析 | |
| 引用本文： | 丁生权,王志军,倪新莉.人大麻素受体启动子真核报告质粒的构建及活性分析[J].神经解剖学杂志,2011,27(1):50-54. |
| 作者姓名： | 丁生权 王志军 倪新莉 |
| 作者单位： | 1. 武警宁夏总队医院麻醉科 2. 宁夏医科大学附属医院,银川,750004 3. 宁夏医科大学附属医院,银川,750004;第四军医大学西京医院麻醉科,西安,710032 |
| 基金项目： | 宁夏自然科学基金(NZ09129) |
| 摘 要： | 目的:利用双荧光素酶报告基因体系,根据大麻素受体1(cannabinoid receptor 1,cnr1)启动子序列不同部位的转录活性来初步确定其活性区域,为脊髓缺血耐受保护中cnr1高表达的转录调控的研究奠定基础。方法:从NCBI中获取cnr1基因转录起始点5’端向上约1800 bp的核苷酸序列,按照300 bp的距离间隔,设计6个不同长度的截短体PCR引物,以人全血基因组DNA为模板,分别扩增cnr1启动子区域的截短体片段,并克隆入荧光素酶报告基因pGL3-Basic质粒中。将含有不同截短体的重组质粒分别转染Hela、Jurket和A549细胞后行荧光素酶活性检测。根据不同截短体转录活性检测结果,确定cnr1启动子活性区域。结果:成功将cnr1启动子区6个不同长度(1800、1500、1200、900、600和300 bp)的截短体克隆入荧光素酶报告基因pGL3-Basic质粒。在3种细胞系Hela、Jurket和A549的荧光素酶活性检测均显示600 bp的截短体转录活性最强。结论:成功构建了cnr1启动子的报告基因重组质粒,初步证实-600 bp到-200 bp区为cnr1的启动子的活性区域,从而为进一步研究cnr1的转录调控奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 缺血耐受 大麻素受体1 启动子活性区域 双荧光素酶报告基因 人 |
Construction and analysis of the luciferase reporter vectors of human cnr1 promoter |
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| Ding Shengquan,Wang Zhijun,Ni Xinli.Construction and analysis of the luciferase reporter vectors of human cnr1 promoter[J].Chinese Journal of Neuroanatomy,2011,27(1):50-54. | |
| Authors: | Ding Shengquan Wang Zhijun Ni Xinli |
| Institution: | Ding Shengquan1,Wang Zhijun2,Ni Xinli2(1.Department of Anesthesiology,Hospital of Ning Xia Armed police,2.Affiliated Hospital of Ningxia Medical University,Yinchuan 750004,3.Department of Anesthesiology,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi'an 710032,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | Ischemic tolerance cnr1 Core promoter Luciferase reporter gene |
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