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人白细胞介素-18在大肠杆菌中的高效表达
引用本文:朱永红,邹全明. 人白细胞介素-18在大肠杆菌中的高效表达[J]. 第三军医大学学报, 2002, 24(2): 184-186
作者姓名:朱永红  邹全明
作者单位:第三军医大学医学检验系临床微生物学教研室,重庆,400038
摘    要:目的 在大肠杆菌中实现人IL-18成熟蛋白(mhIL-18)的高效表达。方法 采用RT-PCR由人肝脏Kupffer细胞中扩增mhIL-18基因,构建非融合型原核表达质粒petTT/mhIL-18,转化至大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导热处理重组蛋白表达,超声裂解细胞提取包涵体,采用SDS-PAGE及Western blot分析重组蛋白的表达,包涵体蛋白经8mol/L尿素溶解,透析复性,ELISA检测重组蛋白诱导人外周血单个核细胞(PBMC)产生IFN-γ的能力。结果 所扩增的mhIL-18基因与GenBank公布的序列一到,经IPTG诱导,mhIL-18在大肠杆菌中的表达量占菌体蛋白的40%以上,,在细胞中以包涵体形式存在,复性的重组蛋白具有诱生IFN-γ的能力。结论 mhIL-18可在大肠杆菌中高效表达。

关 键 词:白细胞介素-18 重组表达 包涵体
文章编号:1000-5404(2002)02-0184-03
修稿时间:2001-03-28

High level expression of non-fusion recombinant human IL-18 in E. coli
ZHU Yong hong,ZOU Quan ming. High level expression of non-fusion recombinant human IL-18 in E. coli[J]. Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae, 2002, 24(2): 184-186
Authors:ZHU Yong hong  ZOU Quan ming
Abstract:
Keywords:interleukin 18  recombinant expression  inclusion body
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