小肠隐窝细胞株(IEC-6):中药生物活性成分筛选的药理模型

目的利用小肠隐窝细胞株(IEC-6)作为模型,筛选党参的生物活性成分.方法IEC-6 细胞以1×104的密度接种于96孔培养板,加入200μL含有50ml/L 超滤胎牛血清、10mg/L胰岛素及 50mg/L庆大霉素的DMEM培养液,24小时后,分别用胃泌素、党参提取物A、B、C、D治疗,对照组用D-PBS.细胞培养24小时后,用MTT法观察细胞增殖,细胞培养12小时后,分别用RT-PCR方法、放射技术和高效液相色谱方法检测细胞鸟氨酸脱羧酶(ODC) mRNA水平、ODC活性及细胞内腐胺含量.结果与对照组比较,胃泌素明显促进IEC-6细胞增殖,明显增加ODC mRNA 水平、ODC活性及细胞内腐胺含量.党参提取物 A、B、C、D以剂量依赖方式作用于IEC-6细胞,提取物A 250mg/L～2000mg/L、提取物 B 125mg/L～2000mg/L、提取物 C 2000mg/L及提取物D 250mg/L～2000mg/L明显促进细胞增殖,而提取物C 30mg/L和125mg/L抑制细胞增殖.结论 通过检测中药对细胞增殖的调节作用,IEC-6 细胞可以作为黏膜损伤修复药物筛选的药理模型,方法简单,结果准确.