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基因重组HBV的构建及其表达反义RNA抗-HBV作用的研究
引用本文:孙殿兴,刘风军,胡大荣,邬光惠,胡学玲,李娟,范公忍.基因重组HBV的构建及其表达反义RNA抗-HBV作用的研究[J].中华传染病杂志,2004,22(2):90-93.
作者姓名:孙殿兴  刘风军  胡大荣  邬光惠  胡学玲  李娟  范公忍
作者单位:1. 050082,石家庄,白求恩国际和平医院肝病科
2. 石家庄市第四人民医院
3. 北京军区总医院肝病研究所
基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 170 85 4)
摘    要:目的 探索利用乙型肝炎病毒 (HBV)作为基因治疗载体的可能性及检验其表达反义RNA抗HBV的作用。方法 在表达完整HBV颗粒的质粒上 ,经基因修饰后分别表达S或S启动子区的反义RNA ,整合于具有HBV复制的 2 .2 .15细胞 ,形成细胞克隆 ,酶联免疫吸附 (ELISA)法检测细胞培养上清液中HBsAg和HBeAg ,斑点杂交法检测细胞内HBV核壳中HBVDNA ,聚合酶链反应(PCR)法检测上清液中重组HBV颗粒。结果  2 .2 .15 pMEP4组、2 .2 .15 SAS组和 2 .2 .15 PAS组对HBsAg平均抑制率分别为 (2 .74± 3.83) %、(6 6 .5 4± 4 .4 5 ) % (P <0 .0 1)和 (5 5 .18± 3.2 7) % (P <0 .0 1) ;对HBeAg平均抑制率分别为 (4 .4 6± 4 .2 5 ) %、(2 6 .36± 1.6 9) % (P <0 .0 1)和 (6 5 .5 4± 3.2 2 ) % (P <0 .0 1) ;对HBV复制的抑制率分别为 17.0 %、5 9.9%和 72 .8%。 2 .2 .15 SAS组及 2 .2 .15 PAS组培养上清液中能检测出突变型HBV颗粒。结论 经过对HBV基因组的两处改造 ,分别在细胞内表达S区及S启动子区反义RNA具有干扰HBV复制及抑制HBV抗原表达的作用 ;在 2 .2 .15细胞中野生型HBV辅助下 ,仍能包装并分泌完整的HBV样颗粒

关 键 词:肝炎病毒  乙型  遗传载体  RNA反义  基因疗法
修稿时间:2002年12月21

Development of packageable replication-defective HBV mutants and experimental study on their anti-HBV effects by expressing antisense RNA
SUN Dian-xing,LIU Feng-jun,HU Da-rong,et al..Development of packageable replication-defective HBV mutants and experimental study on their anti-HBV effects by expressing antisense RNA[J].Chinese Journal of Infectious Diseases,2004,22(2):90-93.
Authors:SUN Dian-xing  LIU Feng-jun  HU Da-rong  
Institution:SUN Dian-xing,LIU Feng-jun,HU Da-rong,et al. Department of Liver diseases,Bethune International Peace Hospital,Shijiazhuang 050082,China
Abstract:
Keywords:Hepatitis B virus  Genetic vectors  RNA antisense  Gene therapy
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