不同浓度5-氮胞苷对小鼠骨髓间充质干细胞的诱导作用

目的探讨5-氮胞苷（5-aza）对小鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）的最佳诱导浓度。方法分离2周龄小鼠胫骨、股骨，冲洗出骨髓，采用Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心和贴壁培养的方法获得MSCs。取传第2代MSCs培养48h后分别加入3、5、10、20、50μmol／L5-aza进行诱导，设为3、5、10、20、50μmol／L组。继续培养3周后观察细胞形态变化，免疫细胞化学法检测心肌特异性蛋白α-actin表达。结果5-aza3、5μmol／L组α-actin阳性率分别为0．88％±0．52％、2．61％±0．96％，两组细胞形态均无明显改变；10μmol／L组可见细胞突起回缩，α-actin呈强阳性表达，阳性率为30．57％±1．82％；20、50μmol／L组细胞已脱落。结论MSCs经5-aza体外诱导分化，可获得形态类似、表达心肌特异性蛋白的心肌样细胞，且以10μmol/L浓度诱导作用最佳。