| 包裹pcDNA3.1（-）/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒的制备以及特性研究 |
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| 引用本文： | 张阳德,吴季霖,潘一峰,赵劲风,王吉伟,金鑫,张红.包裹pcDNA3.1（-）/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒的制备以及特性研究[J].中国神经再生研究,2009,13(51). |
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| 作者姓名： | 张阳德 吴季霖 潘一峰 赵劲风 王吉伟 金鑫 张红 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心,中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划（863计划） |
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| 摘 要： | 摘要
背景：壳聚糖是生物可降解性天然多糖，其生物相容性好，安全无毒，故而在基因成为基因传递方面展现巨大潜力。
目的：采用复凝聚法制备包裹pcDNA3.1(-)/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒，观察研究其相关特性。
设计、时间及地点：对比观察实验，于2009-02/2009-08在国家卫生部纳米生物技术重点实验室完成。
材料：pcDNA3.1（-）/MAGE-3-HSP70由国家卫生部纳米生物技术重点实验室构建，壳聚糖 (批号060306，上海伯奥生物科技有限公司,脱乙酰度>90.0%,粘度<100cps) ，B16细胞由中南大学肿瘤研究所惠赠。
方法：采用复凝聚法制备包裹pcDNA3.1(-)/MAGE-3-HSP70壳聚糖纳米粒，将壳聚糖基因纳米粒转染B16细胞，利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测体外转染效果；应用噻唑蓝(MTT)评价壳聚糖基因纳米粒子的体外细胞毒性。
主要观察指标：激光粒度仪测定壳聚糖基因纳米粒径、Zeta电位；紫外分光光度计检测包封率；凝胶阻滞实验观察壳聚糖和质粒DNA的聚合；DNaseⅠ的保护试验分析壳聚糖基因纳米粒抗核酸酶降解能力。
结果：壳聚糖基因纳米粒的平均粒径约为223 nm,zeta电位为16mV; DNA包封率为92.3%，B16细胞转染实验显示其效率与Lipofectamine 2000相近, 而其毒性远低于Lipofectamine 2000。
结论：壳聚糖纳米粒子可高效装载质粒DNA转染B16细胞,而且对细胞基本无毒。
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| 关 键 词： | 壳聚糖 纳米粒 基因载体 |
| 收稿时间： | 11/6/2009 4:28:01 PM |
The preparation and characteristics of chitosan nanoparticles loaded with pcDNA3.1(-)/MAGE-3-HSP70 |
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| zhangyangde,wujilin,panyifeng,zhaojinfeng,wangjiwei,jinxin and zhanghong.The preparation and characteristics of chitosan nanoparticles loaded with pcDNA3.1(-)/MAGE-3-HSP70[J].Neural Regeneration Research,2009,13(51). |
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| Authors: | zhangyangde wujilin panyifeng zhaojinfeng wangjiwei jinxin and zhanghong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chitosan nanoparticle gene carrier |
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