B16细胞中酪氨酸酶活性测定的方法学研究

目的:建立筒便快速的酶学法测定B16小鼠黑素瘤细胞中酪氨酸酶的活性。方法:培养一定量的B16细胞,提取细胞中的总蛋白,进行蛋白定量,考察孵育时间和反应的酶蛋白浓度,用酶标仪在475nm测定酪氨酸酶催化左旋多巴反应中多巴醌的生成量。结果:孵育时闻在0～25min范围内,r=0.9951,线性关系良好,酶蛋白浓度在0.05～0.3μg/mL范围内,r=0.9969。结论:用本法测定细胞中的酪氨酸酶活性,简便可靠,可为色素障碍性疾病药物的细胞筛选提供进一步的参考数据。