| 敲低细胞角蛋白18对氧化应激诱导细胞凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 顾晶,李平,张部昌,刘萱,曹诚.敲低细胞角蛋白18对氧化应激诱导细胞凋亡的影响[J].军事医学,2013,37(7):509-513. |
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| 作者姓名： | 顾晶 李平 张部昌 刘萱 曹诚 |
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| 作者单位： | 顾晶 (安徽大学生命科学学院,合肥,230039;军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； 李平 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； 张部昌 (安徽大学生命科学学院,合肥,230039)； 刘萱 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； 曹诚 (军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850)； |
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| 摘 要： | 目的研究氧化应激条件下中间纤维蛋白细胞角蛋白(cytokeratin)的抗凋亡作用。方法利用RNA干扰(RNAi)技术敲低细胞内细胞角蛋白18(CK18)的表达,免疫印迹法检测细胞角蛋白的表达水平,并通过A549细胞建立细胞角蛋白敲低稳定细胞系。利用免疫荧光染色技术观察细胞角蛋白对细胞骨架的影响。利用流式细胞技术检测细胞角蛋白对细胞内ROS(reactive oxygen species)水平及氧化应激诱导细胞凋亡的影响。结果筛选获得3个干扰效果较好的RNAi序列,成功利用A549细胞建立细胞角蛋白敲低的稳定细胞系(A549-KD)。CK18表达敲低导致细胞内多种细胞角蛋白表达广泛下调,并破坏细胞微丝及微管骨架结构。氧化应激条件下A549-KD细胞抗凋亡活性显著降低。结论细胞角蛋白参与维持细胞骨架结构,对抗ROS诱导的细胞凋亡,提示其在细胞的氧化应激过程中发挥保护作用。
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| 关 键 词： | 中间丝 细胞角蛋白 细胞骨架 氧化应激 细胞凋亡 |
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