体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞的分化 |
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引用本文: | 贾立山,周 云,张 亚,张 建,张 婷,严向明. 体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞的分化[J]. 中国神经再生研究, 2009, 13(19): 3698-3702 |
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作者姓名: | 贾立山 周 云 张 亚 张 建 张 婷 严向明 |
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作者单位: | 苏州大学附属儿童医院,苏州大学附属儿童医院外科,苏州大学附属儿童医院外科,苏州大学附属儿童医院外科,苏州大学附属儿童医院外科,苏州大学附属儿童医院外科 |
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基金项目: | 苏州市社会发展科技计划项目(SS08021)*;第五批苏州大学医学发展基金项目* |
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摘 要: | 背景:目前骨髓间充质干细胞已经应用于多种组织血管的修复,但涉及尿道血管组织的报道甚少。目的:探讨体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞的可行性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-07/2008-01在苏州大学附属儿童医院儿科研究所完成。材料:清洁级4周龄SD大鼠4只,由苏州大学实验动物中心提供。作为诱导剂的血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞因子为Sigma公司产品。方法:密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,待细胞达80%~90%融合时消化传代。传至第3代,细胞按1×109 L-1密度接种,加入含血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞因子的DMEM培养基向血管内皮细胞诱导分化。主要观察指标:MTT测定细胞生长曲线,免疫荧光法检测细胞表面CD44与Vimentin的表达,光学倒置显微镜下观察诱导后细胞形态变化,电镜观察细胞超微结构。结果:骨髓间充质干细胞生长曲线呈倒“S”型,第3 代细胞表面CD44和Vimentin表达阳性率分别为89.3%和85.6%。向血管内皮细胞诱导1~3 d细胞呈梭形或纺锤形,7 d后变成不规则的圆形或椭圆形,胞浆淡染,胞核较大,核染色质粗,且部分细胞死亡,14 d后整瓶细胞呈漩涡状生长,21~25 d后细胞密集处呈内皮细胞特有的铺路石样排列。诱导后第21天,细胞浆内可见微管、微丝及W-P小体。结论:血管内皮细胞生长因子与碱性成纤维细胞因子联合诱导条件下,骨髓间充质干细胞在体外可分化为血管内皮细胞。
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关 键 词: | 骨髓间充质干细胞;内皮细胞;血管内皮细胞生长因子;碱性成纤维细胞因子;分化 |
Differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells into vascular endothelial cells in vitro |
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