摘 要: | 目的 构建 SJIR - 2 基因的真核表达载体,检测该基因在真核细胞内的表达,为进一步研究该基因作为血吸虫免疫疫苗打下基础。 方法 PCR 反应扩增出目的基因 SJIR - 2 后插入到真核表达载体 pEG FP 中,双酶切鉴定并进行序列测定,以脂质体介导的方法转染 293T 细胞,再以 Western blot 方法检测该基因的编码蛋白在 293T 细胞内的表达情况。 结果 PCR 反应扩增出目的基因 SJIR - 2,构建了 pEGFP - SJIR - 2真核表达载体,双酶切鉴定插入片段大小正确,DNA 测序结果与 GeneBank 中的 SJIR - 2 基因序列同源性为100% ,重组基因成功转染进 293T 细胞中,Western blot 检测出该蛋白在 293T 细胞内的表达。 结论 成功构建了 pEGFP - SJIR - 2 真核表达载体,该基因编码的蛋白可以在真核细胞内表达,为我们进一步探索 SJIR -2 基因的重组疫苗在血吸虫病防治中的作用打下基础。
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