SJIR-2 基因真核表达载体的构建及在真核细胞内表达的研究

目的 构建 ＳＪＩＲ － ２ 基因的真核表达载体，检测该基因在真核细胞内的表达，为进一步研究该 基因作为血吸虫免疫疫苗打下基础。 方法 ＰＣＲ 反应扩增出目的基因 ＳＪＩＲ － ２ 后插入到真核表达载体 ｐＥＧ ＦＰ 中，双酶切鉴定并进行序列测定，以脂质体介导的方法转染 ２９３Ｔ 细胞，再以 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 方法检测该基因 的编码蛋白在 ２９３Ｔ 细胞内的表达情况。 结果 ＰＣＲ 反应扩增出目的基因 ＳＪＩＲ － ２，构建了 ｐＥＧＦＰ － ＳＪＩＲ － ２ 真核表达载体，双酶切鉴定插入片段大小正确，ＤＮＡ 测序结果与 ＧｅｎｅＢａｎｋ 中的 ＳＪＩＲ － ２ 基因序列同源性为 １００％ ，重组基因成功转染进 ２９３Ｔ 细胞中，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测出该蛋白在 ２９３Ｔ 细胞内的表达。 结论 成功构 建了 ｐＥＧＦＰ － ＳＪＩＲ － ２ 真核表达载体，该基因编码的蛋白可以在真核细胞内表达，为我们进一步探索 ＳＪＩＲ － ２ 基因的重组疫苗在血吸虫病防治中的作用打下基础。