| VEGF基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 李丽,张日,岑建农,朱子玲. VEGF基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定[J]. 苏州大学学报(自然科学版), 2008, 28(1): 20-22 |
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| 作者姓名： | 李丽 张日 岑建农 朱子玲 |
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| 作者单位： | 李丽（苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,江苏,苏州,215006）;张日（苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,江苏,苏州,215006）;岑建农（苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,江苏,苏州,215006）;朱子玲（苏州大学附属第一医院,江苏省血液研究所,江苏,苏州,215006） |
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| 基金项目： | 江苏省临床医学中心血液病学学科开放课题基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建血管内皮生长因子(VEGF)基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,为其体内外实验研究提供依据.方法 将靶向VEGF基因的shRNA表达序列连接到慢病毒载体pRNAT-U6.2/Lenti中,获得pRNAT-shVEGF质粒,经PCR和测序鉴定后,与慢病毒包装质粒pPACKHl通过Lipofectamine 2000共转染至包装细胞293T,包装产生病毒液,测定其滴度.结果 PCR扩增和测序结果证实,VEGFshRNA核苷酸链序列插入正确,包装慢病毒产生病毒悬液的滴度为3x107pfu/ml.结论 成功构建人VEGF基因RNAi慢病毒载体,为研究其在白血病细胞中的生物学功能和基因治疗奠定基础.
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| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 RNA干扰 慢病毒 VEGF Gene 基因治疗 RNAi 慢病 毒载体 构建与鉴定 RNA Interference Identification 生物学功能 包装细胞 白血病 悬液 表达序列 核苷酸 测序鉴定 结果 滴度 测定 毒液 生病 |
| 文章编号： | 1673-0399(2008)01-0020-03 |
| 修稿时间： | 2007-01-11 |
Construction and Identification of Lentiviral Vector-mediated RNA Interference of VEGF Gene |
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| LI Li,ZHANG Ri,CEN Jiang-nong,ZHU Zi-ling. Construction and Identification of Lentiviral Vector-mediated RNA Interference of VEGF Gene[J]. Suzhou University Journal of Medical Science, 2008, 28(1): 20-22 |
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| Authors: | LI Li ZHANG Ri CEN Jiang-nong ZHU Zi-ling |
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| Affiliation: | LI Li,ZHANG Ri,CEN Jiang-nong,ZHU Zi-ling(Jiangsu Institute of Hematology,the First Hospital Affiliated to Suzhou University,Jiangsu Suzhou 215006,China) |
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| Abstract: | Objective To construct a lentiviral vector-mediated RNA interference(RNAi) of VEGF gene and provide the basis for further experiments in vivo and in vitro.Methods A VEGF gene targeting short hairpin RNA(shRNA) was cloned into lentiviral expression vector pRNAT-U6.2/Lenti.The recombined vector pRNAT-shVEGF confirmed by PCR and sequencing,was cotransfected with the pPACKH1 packaging plasmids mixture into 293T cells by Lipofectamine 2000.Virus in the supernatant was collected and the virus titer was measured.R... |
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| Keywords: | VEGF RNA interference lentivirus |
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