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人TRAIL分子胞外区的纯化及活性检测
引用本文:唐蓓,何凤田,蔡绍皙,李蓉芬,高会广,陈姗,周度金.人TRAIL分子胞外区的纯化及活性检测[J].中国免疫学杂志,2003,19(8):554-557.
作者姓名:唐蓓  何凤田  蔡绍皙  李蓉芬  高会广  陈姗  周度金
作者单位:1. 重庆大学生物力学与组织工程教育部重点实验室,重庆,400038
2. 第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,重庆,400038
摘    要:目的:利用大肠杆菌表达hTRAIL41-281蛋白,并纯化复性成生物活性形式。方法:以IPTG诱导表达,使用Ni-NTA层析柱分离纯化蛋白,透析法复性,SDS-PAGE和Western blot法进行鉴定,DNA断裂实验检测hTRAIL41-281蛋白的凋亡诱导活性。结果:表达的蛋白以包涵体的形式存在,纯化后得到分子量为30.5kD、纯度在90%以上的蛋白,Western blot证实为hTRARIL41-281分子。经复性,DNA断裂实验检测出该蛋白有较好的诱导肿瘤细胞凋亡活性。结论:成功地利用大肠杆菌表达、Ni—NTA层析柱分离纯化、透析法复性hTRAIL41-281蛋白,并证实其具有诱导肿瘤细胞凋亡的生物学活性。

关 键 词:TRAIL  纯化  活性检测  大肠杆菌  生物学活性
文章编号:1000-484X(2003)08-0554-04

Purification of human TRAIL extracellular region and its activity
TANG Bei,HE Feng-Tian,CAI Shao-Xi et al.Purification of human TRAIL extracellular region and its activity[J].Chinese Journal of Immunology,2003,19(8):554-557.
Authors:TANG Bei  HE Feng-Tian  CAI Shao-Xi
Institution:TANG Bei,HE Feng-Tian,CAI Shao-Xi et al.Department of Biochemistry and Molecular Biology,Third Military Medical University,Chongqing 400038,China
Abstract:
Keywords:TRAIL  Purification  Activity
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