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| 癌基因LMO3的原核表达及多克隆抗体的制备及应用 | |
| 引用本文： | 惠玲,石洁,王晓辉,吕同德,YANG Jin-sheng,杨金升,哈小琴.癌基因LMO3的原核表达及多克隆抗体的制备及应用[J].中华肿瘤防治杂志,2009,16(11). |
| 作者姓名： | 惠玲 石洁 王晓辉 吕同德 YANG Jin-sheng 杨金升 哈小琴 |
| 作者单位： | 1. 兰州军区兰州总医院,医学实验中心,甘肃,兰州,730050 2. 兰州军区兰州总医院,医学实验中心,甘肃,兰州,730050;兰州大学附属第二医院输血科,甘肃,兰州,730030 3. 兰州军区兰州总医院,神经内科,甘肃,兰州,730050 |
| 摘 要： | 目的:制备抗神经特异性表达的癌基因LMO3的多克隆抗体,进行LMO3分子检测和功能研究.方法:采用RT-PCR方法扩增LMO3的基因序列,构建其原核表达载体pET32a-LMO3.在大肠埃希菌中诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE分离纯化原核表达的融合蛋白,PBS溶解聚丙烯酰胺凝胶颗粒中的融合蛋白,乳化后免疫新西兰兔制备多克隆抗体.采用免疫印迹、免疫组化等对该抗体的特异性进行鉴定.结果:构建的重组质粒经酶切鉴定和测序证实序列正确.经诱导表达在相对分子质量为37×103处有一条明显的蛋白条带,与预期值一致;免疫动物所得抗血清效价为1∶16 000,该抗体能够识别原核表达的LMO3蛋白及细胞内源性表达的LMO3蛋白;免疫组化显示,LMO3在SHG44胶质瘤细胞株及脑胶质瘤组织中均有表达. 结论:制备了能识别天然LMO3分子的抗LMO3的多克隆抗体,为检测LMO3分子的表达和进一步研究其功能提供了有力的工具. |
| 关 键 词： | 基因 LMO3 原核表达 抗体 多克隆 |
Prokaryotic expression,polyclonal antiserum preparation and application of oncogene LMO3 |
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| YANG Jin-sheng.Prokaryotic expression,polyclonal antiserum preparation and application of oncogene LMO3[J].Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment,2009,16(11). | |
| Authors: | YANG Jin-sheng |
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| Keywords: | |
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