| TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应在强直性脊柱炎白细胞介素2受体mRNA检测中的应用价值 |
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| 引用本文： | 骆方军,吕建新. TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应在强直性脊柱炎白细胞介素2受体mRNA检测中的应用价值[J]. 中华检验医学杂志, 2006, 29(4): 320-323 |
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| 作者姓名： | 骆方军 吕建新 |
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| 作者单位： | 325035,浙江,温州医学院检验医学院,浙江省医学遗传学重点实验室 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金资助项目（NO.302769,NO.397550） |
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| 摘 要： | 目的利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）检测强直性脊柱炎（AS）患者外周血单个核细胞白细胞介素2受体α（IL-2Rα）mRNA的表达水平,并进行疾病的活动性相关分析.方法根据GenBank提供的序列设计一对引物和一条TaqMan探针.提取外周血单个核细胞（PBMC）总RNA,加入FQ-RT-PCR反应体系,产物切胶回收与pUCm-T载体连接,用T7RNA聚合酶转成cRNA,制备系列浓度参照物.对其特异性、线性、精密度和探针稳定性进行评价.定量HLA-B27阳性组与阴性组AS患者PBMC的IL-2Rα mRNA基因表达并探讨与血浆可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）的相互关系.结果成功构建了IL-2Rα mRNA的cRNA参照物.线性范围7～107 cells/ml,批内CV 8.4%,批间CV 9.6%.对各30例HLA-B27阳性与阴性AS的IL-2Rα mRNA检测表明,与正常对照组结果比较,阳性组与阴性组IL-2Rα mRNA和sIL-2R有明显差异（P〈0.01）.IL-2Rα mRNA对炎症活动评价的灵敏度为96.7%.结论 FQ-RT-PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点;IL-2Rα mRNA比sIL-2R更能反映强直性脊柱炎患者的炎症活动程度.
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| 关 键 词： | 逆转录聚合酶链反应 脊柱炎 强直性 受体 白细胞介素2 |
| 收稿时间： | 2005-08-27 |
| 修稿时间： | 2005-08-27 |
Quantitative analysis of interleukine-2 receptor α mRNA expression in ankylosing sondylitis by fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction and clinical significance |
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| LUO Fang-jun,L Jian-xin. Quantitative analysis of interleukine-2 receptor α mRNA expression in ankylosing sondylitis by fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction and clinical significance[J]. Chinese Journal of Laboratory Medicine, 2006, 29(4): 320-323 |
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| Authors: | LUO Fang-jun L Jian-xin |
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| Affiliation: | School of Laboratory Medicine, Wenzhou Medical College, Zhejiang provincial Key Laboratory of Medical Genetics, Wenzhou 325035, China |
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