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日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗的构建及鉴定
引用本文:向进平,李文桂.日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗的构建及鉴定[J].中国病原生物学杂志,2012(10):762-766.
作者姓名:向进平  李文桂
作者单位:重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所
基金项目:重庆市科委地方病重大专项基金项目(No.2008AB5055,2008AB5008,2008AB5054)
摘    要:目的构建并鉴定日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌(Bb)(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗。方法从本室保存的BL21(DE3)(pET28α-Sj26GST-Sj32)重组菌中抽提质粒pET28α-Sj26GST-Sj32,PCR扩增Sj26GST-Sj32融合基因,将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-Sj26GST-Sj32。将此重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,抽提质粒并进行BamHⅠ及EcoRⅠ双酶切,鉴定载体片段及目的基因片段长度。用电穿孔法将重组质粒pGEX-Sj26GST-Sj32转化至Bb,构建重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32),抽提质粒,进行PCR鉴定。结果 PCR成功扩增出长度为1 991bp的Sj26GST-Sj32融合基因;双酶切证实Sj26GST-Sj32融合基因成功插入质粒pGEX-1λT中;PCR证实从重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗中扩增出1991bp的Sj26GST-Sj32融合基因。结论成功构建重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗。

关 键 词:血吸虫  日本  疫苗  两歧双歧杆菌  质粒

Construction and identification of a recombinant Bifidobacterium bifidum(pGEX-Sj26GST-Sj32) vaccine against Schistosoma japonicum
XIANG Jin-ping,LI Wen-gui.Construction and identification of a recombinant Bifidobacterium bifidum(pGEX-Sj26GST-Sj32) vaccine against Schistosoma japonicum[J].Journal of Pathogen Biology,2012(10):762-766.
Authors:XIANG Jin-ping  LI Wen-gui
Institution:(Institute of Infectious and Parasitic Disease,the First Affiliated Hospital,Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China)
Abstract:
Keywords:
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