冠心平片含药血清对（H2）（O2）诱导人血管内皮细胞凋亡及NF-κB蛋白表达的影响

目的 探讨冠心平片含药血清抗H2O2诱导血管内皮细胞(vascular endothelial cells, VEC)凋亡作用及对核因子 κB (nuclear factor kappa B, NF-κB)蛋白表达的影响。方法 将大白兔随机分为正常组(生理盐水，10 mL/kg)、维拉帕米组(0.02 g/kg，10 mL/kg)、冠心平小剂量组(2.8 g/kg，10 mL/kg)、冠心平中剂量组(5.6 g/kg，10mL/kg)、冠心平大剂量组(11.2 g/kg，10 mL/kg)，每组3只。灌胃给药，连续3天，最后1天灌胃2次，间隔2 h，末次给药后1 h，耳缘静脉采血，放置1 h，2 500 r/min离心30 min，吸取血清，56 ℃、30 min灭活，制备含药血清。采用100 μmol/L H2O2作用于对数生长期的VEC建立细胞凋亡损伤模型。造模后分为6组，每组5个样本：正常组(10%空白血清培养液)、模型组(10%空白血清培养液+100 μmol/L H2O2)、维拉帕米组(10%维拉帕米血清培养液+100 μmol/L H2O2)、冠心平低剂量组(10%低剂量冠心平血清培养液+100 μmol/L H2O2)、冠心平中剂量组(10%中剂量冠心平血清培养液+100 μmol/L H2O2)、冠心平高剂量组(10%高剂量冠心平血清培养液+100 μmol/L H2O2)。采用流式细胞术检测VEC凋亡率，采用Western blot检测NF-κB蛋白表达。结果 模型组VEC凋亡率(9.00%±1.18%)、NF κB蛋白表达(0.39%±0.06%)较正常组升高(P<0.01)；与模型组比较，维拉帕米组(6.00%±0.18%)及冠心平高剂量组(5.30%±0.08%)、中剂量组(6.83%±0.51%)VEC凋亡率明显降低，各给药组NF-κB蛋白表达显著降低(维拉帕米组：0.28%±0.03%，冠心平低剂量组：0.33%±0.03%，冠心平中剂量组：0.30%±0.03%，冠心平高剂量组：0.28%±0.04%, P<0.01, P<0.05)。结论 冠心平片可以拮抗H2O2诱导VEC的凋亡效应，其机制可能与调节NF-κB有关。