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逆转录病毒介导耐药基因的高效表达
引用本文:傅建新,王玮,王玲,朱子玲,陈子兴. 逆转录病毒介导耐药基因的高效表达[J]. 江苏医药, 2000, 26(4): 264-266
作者姓名:傅建新  王玮  王玲  朱子玲  陈子兴
作者单位:215006,苏州医学院附属第一医院,江苏省血液研究所
基金项目:江苏省卫生厅科研基金!(H95 49)资助
摘    要:目的 建立多药耐药基因MDR1的逆转录病毒转移系统。方法 脂质体转染法将携带MDR1基因的逆转录病毒载体HaMDR导入单向型包装细胞GP E86 ;用获得的单向型病毒重复转导双嗜型包装细胞GP envAm12 ,经秋水仙碱加压选择获得高滴度的病毒生产细胞Am12 /HaM DR ;MDR1基因的转移和表达用聚合酶链反应 (PCR)、MTT比色法和流式细胞术 (FCM )分析。结果 单向型与双嗜型病毒生产细胞的滴度分别为 6 2× 10 5和 9 0× 10 5CFU/ml;PCR分析证实生产细胞有MDR1基因整合并稳定表达 ,但同时存在异常剪接的转录本 ;MTT比色法和FCM分析显示MDR1基因转移细胞的耐药程度提高 12~ 2 6 7倍 ,P 糖蛋白表达率达 97%~ 99%。结论 逆转录病毒可有效介导MDR1基因转移和表达 ,为导入造血干 /祖细胞后进行根治性化疗奠定基础。

关 键 词:逆转录病毒 基因转移 基因治疗 MDR基因 基因表达

Efficient Expression of Drug Resistance Gene Mediated by Retrovirus
Abstract. Efficient Expression of Drug Resistance Gene Mediated by Retrovirus[J]. Jiangsu Medical Journal, 2000, 26(4): 264-266
Authors:Abstract
Abstract:
Keywords:Retrovirus Gene transfer Gene therapy Genes  MDR Gene expression  
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