转化生长因子β1对人牙本质基质蛋白1基因转录活性的影响

目的：观察具有矿化活性的人牙髓干细胞（human dental pulp stem cell，HDPSC）在重组人转录生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）作用下对牙本质基质蛋白1（dentin matrix protein1，Dmp1）表达和Dmp1基因启动子转录活性的影响。方法：通过建立体外培养的HDPSC矿化诱导模型，经10ng／L重组人TGF-β1刺激后，运用RT-PCR、报告基因检测等方法检测细胞在TGF-β1作用后Dmpl mRNA表达变化以及对pGL3-P-193-＋86和pGL3-P505-＋86 2个启动子片段重组报告基因载体活性的影响。结果：诱导矿化后具有部分成牙本质细胞样细胞特征的HDPSC经TGF-β1刺激后，Dmp1 mRNA的表达水平明显下降，并存在时间依赖性。pGL3-P-193-＋86和pGL3-P-505-＋86相对荧光素酶活性均下降，以pGL3-P-505-＋86活性下降更明显，说明TGF-β1具有下调HDPSC Dmp1转录活性的作用。计算机分析结果发现，Dmp1基因启动子-505～＋86bp区存在多个TGF-β1下游作用分子Smads的结合位点。结论：TGF-β1可下调Dmpl mRNA的表达水平和转录活性，以pGL3-P-505-＋86活性下降更明显。启动子-505—-193bp区存在TGF-β1下游作用分子或转录因子的结合位点，从而参与下调Dmp1转录表达过程。