激酶4抑制因子家族基因表达的激活对肠癌细胞增殖侵袭的影响

目的探讨激活激酶4抑制因子（INK4）家族（P15ink4b和P16ink4a／CDKN2）基因表达对结肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法应用1×10^-7、5×10^-7及1×10^-6mol／L不同浓度的特异性DNA甲基转移酶抑制剂（5-Aza-CdR）对结肠癌RKO细胞进行去甲基化处理（分别为A、B、C3个实验组），另设阳性对照组（未经处理的RKO细胞）。Western blot法检测INK4家族基因的蛋白表达：软琼脂克隆细胞集落实验评估体外致瘤情况；Transwell小室实验评估体外迁移情况。将各组RKO细胞注射BALB／c裸鼠（每组10只），通过称量瘤体的重量和体积评估体内成瘤情况。结果A、B、C3组实验组细胞中P15ink4b和P16ink4a／CDKN2蛋白表达分别为阳性对照组的1．13、1．38、1．92倍和1．11、1．45、2．14倍。体外实验显示，B组和C组的细胞集落数明显少于阳性对照组（P〈0．05）；3组实验组的细胞迁移数均明显少于阳性对照组（P〈0．05）。体内实验显示，相对于阳性对照组，3组实验组裸鼠的抑瘤率分别为2．1％、16．8％和26．2％，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论激活INK4家族基因的表达能有效抑制结肠癌细胞的增殖和迁移。