| 抗人膀胱癌单克隆抗体重链可变区基因的克隆及原核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 温儒民,张俊杰,陈家存,薛松,胡书群,孙亚峰,裴冬生.抗人膀胱癌单克隆抗体重链可变区基因的克隆及原核表达载体的构建[J].江苏医药,2007,33(4):344-346. |
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| 作者姓名： | 温儒民 张俊杰 陈家存 薛松 胡书群 孙亚峰 裴冬生 |
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| 作者单位： | 1. 221002,徐州医学院附属医院泌尿外科
2. 徐州分子生物学研究中心 |
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| 基金项目： | 江苏省高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 克隆抗人膀胱癌单克隆抗体重链可变区基因(VH),并构建其原核表达载体.方法 从能分泌抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞BDI-1中提取总RNA,通过RT-PCR扩增出VH cDNA,用HindⅢ和XhoⅠ酶切纯化的RT-PCR产物和原核表达载体pET28a( ),在T4 DNA连接酶作用下室温连接.重组质粒经酶切鉴定,阳性克隆测序并进行序列分析.结果 扩增出VH cDNA片段,大小约为370bp,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致.VH基因序列长度为366bp,编码122个氨基酸.VH基因属于鼠免疫球蛋白重链Ⅱ亚类.结论 成功克隆出抗人膀胱癌单克隆抗体重链可变区基因,并成功构建其原核表达载体.
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| 关 键 词： | 膀胱肿瘤 基因 单克隆抗体 原核表达载体 人膀胱癌 单克隆抗体 重链可变区基因 原核 表达载体的构建 expression vector prokaryotic constructing human bladder carcinoma monoclonal antibody genes region variable heavy chain sequence analysis 免疫球蛋白重链 氨基酸 编码 序列长度 预期 |
| 文章编号： | 0253-3685(2007)04-0344-03 |
| 修稿时间： | 2006-07-07 |
Cloning and sequence analysis of the heavy chain variable region genes of monoclonal antibody against human bladder carcinoma and constructing prokaryotic expression vector |
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| WEN Rumin,ZHANG Junjie,CHEN Jiacun,et al..Cloning and sequence analysis of the heavy chain variable region genes of monoclonal antibody against human bladder carcinoma and constructing prokaryotic expression vector[J].Jiangsu Medical Journal,2007,33(4):344-346. |
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| Authors: | WEN Rumin ZHANG Junjie CHEN Jiacun |
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| Institution: | Department of Urology, Affiliated Hospital, Xuzhou Medical College, Xuzhou 221002, CHINA |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bladder neoplasm Gene Monoclonal antibody Prokaryotic expression vector |
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