| 人GL50转基因细胞的构建及其生物学功能研究 |
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| 引用本文： | 刘彤,王凤鸣,孙静.人GL50转基因细胞的构建及其生物学功能研究[J].山东医药,2009,49(39):39-41. |
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| 作者姓名： | 刘彤 王凤鸣 孙静 |
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| 作者单位： | 1. 苏州农业职业技术学院,江苏苏州215008;苏州大学医学生物技术研究所
2. 苏州大学医学生物技术研究所 |
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| 摘 要： | 目的 构建稳定表达人GL50基因的小鼠成纤维母细胞L929细胞株,探讨GL50 信号通路对T细胞的共刺激效应.方法 Trizol一步法抽提人扁桃体细胞RNA,RT-PCR法扩增出GL50基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-Term,与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72 h,经Zeocin 筛选出稳定表达GL50分子的L929细胞株;采用3H-TdR掺入实验观察GL50信号对T 细胞体外培养的共刺激作用.结果 成功构建含GL50基因的重组逆转录病毒载体,并获得含有GL50基因的重组病毒,筛选获得能稳定高表达人GL50分子的L929转基因细胞;该转基因细胞对体外培养的T细胞具有促增殖和活化作用;同时,GL50/ICOS信号与CD28/B7 信号具有协同作用.结论 GL50/ICOS信号在机体免疫应答过程中起重要作用;GL50转基因细胞的成功构建为进一步研究GL50分子功能奠定了良好基础.
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| 关 键 词： | GL50基因 逆转录病毒 稳定表达 增殖 |
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