血清抗甲状腺过氧化物酶抗体ELISA定量方法的建立

摘要：目的：建立一种ELISA方法用于定量分析血清抗甲状腺过氧化物酶（TPO）抗体（TPOAb）。 方法：用生物素化牛血清清蛋白（BSA）和链霉亲合素包被微孔板，同时加入生物素化TPO抗原和待检血清，再加入酶标记抗人IgG，建立间接包被模式酶联免疫法测定抗TPO抗体。经方阵滴定确定生物素化抗原和酶标抗体的最适浓度，优化反应条件，并进行方法学评价。 结果：本法抗原包被量为0.083 μg/mL，检测灵敏度为0.165 IU/mL；高、低浓度混合血清批间变异系数（CV）为9.2%、9.0%，批内CV为4.6%、5.6%；回收率为96.0%~104.0%;包被板37 ℃放置5 d保持稳定；与抗甲状腺球蛋白抗体（TGAb）交叉反应率为0.22%。经检测120例健康人，将参考值定为<65.7 IU/mL。与Abbott公司试剂盒检测结果的相关系数（r）为0.985（P<0.01）。 结论：间接包被模式适合TPOAb测定，包被抗原用量少,方法灵敏度高，特异性强；操作简单，成本较低，适合基层医院。

A novel enzyme-linked immunosorbent assay for quantitative detection of anti thyroid peroxidase antibodies in serum

Objective To establish a novel enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for quantitative detection of the concentration of anti-thyroid peroxidase antibody(TPOAb) in serum.Methods The microtiter plate was coated with biotinylated bovine serum albumin(BSA) and streptavidin.The biotinylated TPO antigen and standardized anti-TPOAb or test sera were successively added into the wells of plate.The HRP-anti-IgG was then added into the plate for colorization.The optimal concentrations of biotinylated TPO antigen an...