脐带血和乳腺癌患者外周血来源CIK细胞PD-1表达及对MCF-7细胞杀伤

目的：探讨脐带血和乳腺癌患者外周静脉血来源的CIK细胞程序性死亡分子-1（programmed cell death-1，PD-1）的表达及其对乳腺癌MCF-7细胞的杀伤作用。方法: 采集2015年6月至2015年12月在解放军第105医院住院的健康产妇脐带血和乳腺癌患者外周静脉血各5例，分离PBMC，体外培养、扩增CIK细胞。流式细胞术检测不同时间节点两种来源的CIK细胞PD-1表达情况，分别取培养第7、14、21、28天的CIK细胞与MCF-7细胞共培养，细胞计数（CCK-8）法测定CIK细胞对MCF-7细胞的杀伤率, 吖啶橙-溴化乙啶双染(AOEB)法观察共培养后CIK细胞凋亡变化，流式细胞术检测CIK细胞凋亡率。结果: 随着体外培养时间的延长，脐带血和乳腺癌患者静脉血来源的CIK细胞PD-1表达率均逐渐上升，第14天时脐带血组CIK细胞PD-1表达率低于乳腺癌组\（38.42±4.76）% vs （50.54±3.50）%，P<0.05\]，至第21天后两组PD-1表达率均升高，但差异无统计学意义（P>0.05）。培养第7、14、21、28天两组CIK细胞对MCF-7细胞的杀伤率分别为(18.54±354）%和（21.74±427）%、（71.86±16.86）% 和（58.78±24.25）%、（44.32±26.87）%和（43.96±26.04）%、（43.24± 24.27）%和（40.28±23.69）%，以培养第14天的脐带血来源的CIK细胞的杀伤活性最强（P<0.05）。分析发现，两种来源的CIK细胞PD-1表达水平与CIK细胞的凋亡率呈正相关(r=0.971，r=0.900, 均P<0.01），与杀伤率呈负相关（r=-0.865，r=-0885, 均P<0.01）。结论: 活化的CIK细胞表面高表达PD-1，脐带血较乳腺癌患者静脉血来源的CIK细胞表面PD-1水平低；培养第14天的CIK细胞凋亡率均较低，其杀伤能力更强。

Expression of PD-1 in CIK cells derived from umbilical cord blood or peripheral blood from breast cancer patients and the cytotoxicity of CIKs on MCF-7 cells