| 实时荧光定量PCR检测鸟苷酰环化酶C基因表达方法的建立 |
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| 引用本文： | 毛振彪,张冬雷,黄介飞,王唯一,鞠少卿.实时荧光定量PCR检测鸟苷酰环化酶C基因表达方法的建立[J].临床检验杂志,2006,24(3):176-178. |
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| 作者姓名： | 毛振彪 张冬雷 黄介飞 王唯一 鞠少卿 |
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| 作者单位： | 南通大学附属医院,消化内科,江苏,南通,226001;南通大学附属医院,检验医学中心,江苏,南通,226001 |
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| 摘 要： | 目的建立实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测鸟苷酰环化酶C(GC-C)基因表达的方法。方法在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中GC-C mRNA含量,并以GC-C mRNA和β2M mRNA含量的比值作为评价GC-C表达水平的指标。结果本法检测GC-C mRNA含量的线性范围为101pg／ml-109pg／ml,样本批内和批间CV值分别为6．87％一11．12％和8．86％- 15．19％。30例健康献血员和11例大肠良性病变患者的外周血单个核细胞(PBMC)中均未检出GC-C mRNA表达,大肠癌患者PBMC的GC-C mRNA检出率为83．8％(31／37),表达水平为0．88±0．06。10例大肠癌组织和T84细胞株均检出GC-C mRNA,表达水平分别为每μg组织(0．86±0．07)和每个细胞0．0082。结论成功建立RFQ-PCR检测GC-C mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度、特异性和可重复性。
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| 关 键 词： | 鸟苷酰环化酶C 外周血单个核细胞 实时荧光定量 |
| 文章编号： | 1001-764X(2006)03-0176-03 |
| 收稿时间： | 2005-05-16 |
| 修稿时间： | 2005-11-19 |
Measurement of the expression level of guanylyl cyclase-C in the peripheral blood mononuclear cell by real-time fluorenscence quantitative method |
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| MAO Zhenbiao,ZHANG Donglei,HUAN Jiefei,WANG Weiyi,JU Shaoqing.Measurement of the expression level of guanylyl cyclase-C in the peripheral blood mononuclear cell by real-time fluorenscence quantitative method[J].Chinese Journal of Clinical Laboratory Science,2006,24(3):176-178. |
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| Authors: | MAO Zhenbiao ZHANG Donglei HUAN Jiefei WANG Weiyi JU Shaoqing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | guanylyl cyclase-C peripheral blood mononuclear cell real-time fluorenscence quantitation |
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