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热诱导凋亡胶质瘤细胞致敏树突状细胞疫苗的制备与鉴定
引用本文:吴立权,沈恒,陈谦学,冀保卫,刘宝辉,张申起,田道锋.热诱导凋亡胶质瘤细胞致敏树突状细胞疫苗的制备与鉴定[J].中国现代神经疾病杂志,2009,9(6).
作者姓名:吴立权  沈恒  陈谦学  冀保卫  刘宝辉  张申起  田道锋
作者单位:武汉大学人民医院神经外科,430060
基金项目:国家自然科学基金资助项目,湖北省自然科学基金资助项目 
摘    要:目的 制备热诱导凋亡胶质瘤细胞致敏树突状细胞疫苗,探讨其增强树突状细胞抗原递呈、诱导细胞毒性T淋巴细胞产生更强肿瘤细胞杀伤作用的机制.方法 采用改良Inaba法,在重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)作用下,体外诱导扩增小鼠骨髓来源的树突状细胞,电子显微镜和流式细胞术检测其生物学特征;分别以不同加热温度处理U251细胞,制备凋亡U251细胞致敏树突状细胞疫苗,3H-TdR掺入法和MTT法检测T淋巴细胞增殖能力和活化细胞毒性T淋巴细胞杀伤率.结果 在rmGM-CSF和rmIL-4作用下,小鼠骨髓来源细胞体外培养6~7 d即可诱导出树突状细胞,经倒置相差显微镜和电子显微镜证实细胞表面呈典型树突状结构;流式细胞术检测证实其表达特异性表面标记物CD11c,同时表达功能相关性抗原CD80、CD86和MHCⅡ.倒置相差显微镜和流式细胞术确定热诱导U251细胞凋亡的最佳条件为:44℃处理3 h再常规培养12 h,凋亡U251细胞可更好地负载树突状细胞,负载的树突状细胞可以激发T淋巴细胞增殖,诱导活化细胞毒性T淋巴细胞具有更强的杀伤肿瘤细胞的能力.结论 在rmGM-CSF和rmIL-4作用下,经体外成功制备的小鼠骨髓来源的树突状细胞,可热诱导凋亡胶质瘤细胞敏敏树突状细胞疫苗于体外有效激发T淋巴细胞增殖,诱导细胞毒性T淋巴细胞产生较强的杀伤肿瘤细胞能力.

关 键 词:高温  诱发  细胞凋亡  脑肿瘤  神经胶质瘤  树突细胞  癌症疫苗  免疫疗法

Preparation and identification of dendritic cells vaccine sensitized by hyperthermia-induced apoptotic glioma cells
WU Li-quan,SHEN Heng,CHEN Qian-xue,JI Bao-wei,LIU Bao-hui,ZHANG Shen-qi,TIAN Dao-feng.Preparation and identification of dendritic cells vaccine sensitized by hyperthermia-induced apoptotic glioma cells[J].Chinese Journal of Contemporary Neurology and Neurosurgery,2009,9(6).
Authors:WU Li-quan  SHEN Heng  CHEN Qian-xue  JI Bao-wei  LIU Bao-hui  ZHANG Shen-qi  TIAN Dao-feng
Abstract:
Keywords:
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