用DNA序列分析鉴定一种吸虫囊蚴的分类地位

目的 从浙江华溪蟹(Sinopotamon chekiangense)体内检出一种大型囊蚴，对其ITS2基因进行序列测定与分析比较。为鉴定虫种提供依据。方法 根据基因保守区域序列，合成上下游引物。用PCR技术从囊蚴基因组DNA中扩增ITS2基因。用双脱氧末端终止法进行双向测序。测序结果用GENEDOC进行同源性分析。应用软件TREECCN以最大似然法构建种系发生树。结果 PCR扩增得到大型囊蚴ITS2基因片段。该基因全长432bp,无内含子，编码138个氨基酸。通过用GENEDOC软件检索GenBank基因库中已有的ITS2基因并进行同源性比较，表明该大型囊蚴的ITS2基因序列与棘口吸虫(Echinastoma paraensei)、斜睾科吸虫(Plagiorchis elegans;Plagiorchis maculosus;Skrjabinoeces similes)共四种吸虫有较近的亲缘关系。结论 根据ITS2基因序列数据经TREECCN软件分析得到的系统发生关系树显示该囊蚴明显不属并殖科，而与棘口科，斜睾科吸虫的分子进化关系密切。该囊蚴对人体的致病性值得进一步研究。