miR-195启动子甲基化对膀胱癌细胞功能的影响

目的分析miR-195在膀胱癌组织和细胞系中的表达情况及其对细胞增殖及凋亡的影响,探讨miR-195启动子甲基化与膀胱癌细胞功能的关系。方法实时荧光定量PCR检测miR-195在膀胱癌及癌旁组织、膀胱癌细胞系T24中的表达水平;用寡核苷酸片段NC-mimics和miR-195-mimics转染膀胱癌T24细胞系,噻唑蓝(MTT)法、克隆形成实验、细胞凋亡试验检测转染后对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响;用DAC(甲基化酶抑制剂)处理T24细胞后,实时荧光定量PCR检测miR-195表达水平。结果膀胱癌组织中miR-195的表达水平-10.35,(-27.58,-4.38)]较癌旁组织1.01,(1.00,1.02)]明显降低(Z=-7.75,P0.01),T24细胞中miR-195的表达水平是SV-HUC-1细胞中的3.81×10~(-5)(3.05×10~(-6),7.63×10~(-6))]倍(Z=-2.09,P0.01)。与阴性对照组(转染NC-mimics)和空白对照组(只加转染试剂)比较,T24细胞转染miR-195 mimics后第1天(F=15.8,P0.01)、第2天(F=220.43,P0.01)和第3天(F=2 779.00,P0.01)时细胞增殖能力受到明显的抑制,并且细胞出现凋亡。空白对照组、阴性对照组和实验组的细胞克隆形成数分别为(895±5)个、(790±5)个、(390±10)个,差异有统计学意义(F=1 710.27,P0.01)。与空白对照组比较,1μmol/L DAC处理组及3μmol/L DAC处理组中T24细胞在24 h(F=186.5,P0.01),48 h(F=120.88,P0.01),72 h(F=16 275.00,P0.01)时的miR-195表达水平均明显上调。26例癌组织中miR-195启动子区的甲基化水平较癌旁组织升高(χ2=25.28,P0.01)。结论膀胱癌组织中miR-195低表达,miR-195可能参与调控食管癌T24细胞的增殖和凋亡,miR-195启动子甲基化与膀胱癌细胞的功能密切相关。

Effects of miR-195 methylation on the function of bladder cancer cells