| LMP1与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒的制备 |
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| 引用本文： | 李先茂,赵彤,朱梅刚,张三泉,张进华.LMP1与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒的制备[J].第四军医大学学报,2005,26(17):1537-1539. |
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| 作者姓名： | 李先茂 赵彤 朱梅刚 张三泉 张进华 |
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| 作者单位： | 南方医科大学基础部病理学教研室,广东,广州,510515 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金，中国博士后科学基金 |
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| 摘 要： | 目的: 制备EB病毒LMP1与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒. 方法: 采用RT- PCR方法获得LMP1全外显子片段,使之克隆到带绿色荧光蛋白慢病毒表达载体质粒FUGW中. 经限制性酶切、PCR扩增和测序鉴定重组载体. 在脂质体介导下将慢病毒包装系统的包装结构基因pCMV.△8.9、包膜基因VSVG、目的基因FUGW-LMP1导入病毒包装细胞293FT, 荧光显微镜检测基因的表达,包装成病毒后,收集病毒上清,浓缩,PCR鉴定. 结果: 限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实RT-PCR获得的LMP1 cDNA片段与GenBank中的数据完全吻合; LMP1准确克隆入FUGW的多克隆位点. 慢病毒的3种质粒可高效转染入293FT细胞,荧光显微镜下观察可见大量的绿色荧光. 绿色荧光位于细胞的胞膜及胞质. 结论: 成功制备了LMP1与GFP融合基因慢病毒,为研究EBV瘤基因LMP1在多种疾病中的作用机制提供适合的稳定转染细胞的载体.
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| 关 键 词： | 潜伏膜蛋白1 聚合酶链反应 慢病毒 |
| 文章编号： | 1000-2790(2005)17-1537-03 |
| 收稿时间： | 11 9 2004 12:00AM |
| 修稿时间： | 12 16 2004 12:00AM |
Production of lentivirus of LMP1 and GFP recombinant gene |
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| LI Xian-Mao,ZHAO Tong,ZHU Mei-Gang,ZHANG San-Quan,ZHANG Jin-Hua.Production of lentivirus of LMP1 and GFP recombinant gene[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2005,26(17):1537-1539. |
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| Authors: | LI Xian-Mao ZHAO Tong ZHU Mei-Gang ZHANG San-Quan ZHANG Jin-Hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | latent membrane protein 1 polymerase chain reaction lentivirus |
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