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| 牛朊蛋白理化性质分析及其多克隆抗体的制备 | |
| 引用本文： | 杜芬,梅芳华,肖庚富,梁毅.牛朊蛋白理化性质分析及其多克隆抗体的制备[J].武汉大学学报(医学版),2009,30(5). |
| 作者姓名： | 杜芬 梅芳华 肖庚富 梁毅 |
| 作者单位： | 1. 武汉大学医学院生物化学与分子生物学系,湖北,武汉,430071;武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072 2. 武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072 3. 武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072;中国科学院武汉病毒学研究所,湖北,武汉,430071 |
| 基金项目： | 教育部“长江学者和创新团队发展计划”(编号:IRT0745);;国家自然科学基金资助项目(编号:30770421);;973计划(编号:2006CB910301) |
| 摘 要： | 目的:研究酸诱导牛正常细胞朊蛋白(BoPrPC)变性过程中间体的结构,同时制备其多克隆抗体。方法:表达纯化蛋白质后通过荧光光谱法和圆二色法分析酸性条件下BoPrPC二级结构变化。同时制备多克隆抗体,通过ELISA测定多克隆抗体效价,Western blot测定其特异性。结果:酸诱导BoPrPC去折叠并在pH 4.0条件下形成去折叠中间体,易于形成淀粉样纤维聚集体。制备的多克隆抗体效价可达到1∶6 400,能特异性结合朊蛋白。结论:折叠中间体二级结构类似致病BoPrPSc能形成淀粉样纤维聚集体,成功地制备了效价及特异性良好的兔抗BoPrPC多克隆抗体,为研究阻断致病朊蛋白形成淀粉纤维聚集体防治神经细胞损伤以及临床特异性检测奠定基础。 |
| 关 键 词： | 牛正常细胞朊蛋白 致病朊蛋白 酸变性 多克隆抗体 |
Physico-Chemical Property and Polyclonal Antibody Production of Bovine Prion Protein |
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| DU Fen,MEI Fanghua,XIAO Gengfu,LIANG Yi.Physico-Chemical Property and Polyclonal Antibody Production of Bovine Prion Protein[J].Medical Journal of Wuhan University,2009,30(5). | |
| Authors: | DU Fen MEI Fanghua XIAO Gengfu LIANG Yi |
| Institution: | DU Fen1,2,MEI Fanghua 2,XIAO Gengfu2,3,LIANG Yi21 Dept.of Biochemistry,School of Medicine,Wuhan University,Wuhan 430071,China2 State Key Laboratory of Virology,College of Science,Wuhan 430072,China3 Wuhan Institute of Virology,Chinese Academy of Sciences,China |
| Abstract: | Objective: To study the intermediate structure of denatured bovine prion protein(BoPrPC) induced by acid,and to prepare and identify its polyclonal antibody.Methods: The recombinant bovine mature prion protein(BoPrPC) has been expressed and purified.Fluorescence spectroscopy and circular dichroism were used to study the structure change of BoPrPC induced by acid.BoPrPC was used to immune the rabbit for preparing polyclonal antibody.The titer and specificity of the rabbit's antiserum was measured by ELISA an... |
| Keywords: | Cell Bovine Prion Protein Pathogenic BoPrPSc Acid Polyclonal Antibody |
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