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| 抗NI-35重组单链抗体基因cDNA的合成与克隆 | |
| 引用本文： | 王运杰,王勇,孙涛,吴安华,邵春波,高维军. 抗NI-35重组单链抗体基因cDNA的合成与克隆[J]. 中华神经外科杂志, 2004, 20(1): 48-50 |
| 作者姓名： | 王运杰 王勇 孙涛 吴安华 邵春波 高维军 |
| 作者单位： | 1. 110001,沈阳,中国医科大学第一临床学院神经外科 2. 中国医科大学细胞生物系 3. 辽宁盘锦市第二人民医院 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(39970753) |
| 摘 要： | 目的抗NI-35抗体(anti-NI-35antibody)作为神经再生抑制因子(NI-35)的拮抗剂对神经再生促进作用的研究是近年的热点,研究表明,抗NI-35抗体能促进体内外受损伤神经元的存活和突起生长。我们重新设计并人工合成抗NI-35重组单链抗体(anti-NI-35-scfv)的cDNA克隆构建其表达载体,在原核系统中实现初步表达。方法参照genebank中发表的抗NI-35抗体的轻链重链序列,重新设计适于在大肠杆菌中表达的目的基因片段,将该基因双链分成35个小片段合成,经退火、复性连接成目的片段后,克隆到经过BamHI和HindIII双酶切的克隆载体pUC18中,并转化大肠杆菌DH5a,抽提重组子pUC18/744进行克隆PCR、酶切鉴定及测序分析。结果测序结果证明获得的基因序列与实验设计仅差一个碱基。结论正确合成了抗NI-35重组单链抗体(anti-NI-35-single-chainantibody)为抗NI-35抗体应用于治疗弥漫性轴索损伤提供了实验基础。 |
| 关 键 词： | 抗NI-35重组单链抗体(anti-NI-35-scFv) 基因合成 克隆 |
| 修稿时间： | 2002-05-21 |
Synthesis cloning and sequencing the cDNA of the recombinant anti-NI-35 single-chain antibody |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Recombinant anti-NI-35 single-chain antibody Gene synthesis Gene cloning |
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