橙皮苷对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的探讨橙皮苷(Hesp)对缺血再灌注(I/R)大鼠肾脏的保护作用及其对磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为3组:假手术(SO)组、肾脏I/R(I/R)组和肾脏I/R+Hesp处理(I/R+Hesp)组;在机制探讨中给予PI3K/AKT特异性抑制剂(LY294002,0.3mg/kg)进行干预。I/R+Hesp组在肾脏I/R术前连续3d给予Hesp(100mg/kg,溶于0.5%羧甲基纤维素钠溶液)灌胃处理。采用右侧肾切除伴左侧肾血管结扎45min再灌注24h方法建立肾脏I/R损伤模型。酶联免疫吸附试验检测血清肌酐(Cr)与尿素氮(BUN)含量;苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏病理损伤程度;TUNEL染色评估凋亡;超氧化物歧化酶(SOD)活性分析及丙二醛(MDA)含量评估氧化应激反应。Western印迹检测相关蛋白表达情况。结果与I/R组比较,I/R+Hesp组Bax、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved caspase)-9、cleaved caspase-3蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高,凋亡率显著降低,SOD活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05)。与I/R组比较,I/R+Hesp组磷酸化(p)-PI3K、p-AKT蛋白表达显著升高(P<0.05)。与I/R组比较,I/R+Hesp组肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)蛋白表达及肾小管损伤评分均显著降低(P<0.05)。结论Hesp通过PI3K/AKT依赖性途径在I/R肾脏凋亡及氧化应激关键致病环节发挥保护功能。