| 携载人基质金属蛋白酶组织抑制剂-2基因重组腺病毒载体的构建 |
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| 引用本文： | 赵新,景在平,廖明芳,张素贞.携载人基质金属蛋白酶组织抑制剂-2基因重组腺病毒载体的构建[J].介入放射学杂志,2003,12(4):287-290. |
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| 作者姓名： | 赵新 景在平 廖明芳 张素贞 |
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| 作者单位： | 200433,上海,第二军医大学附属长海医院血管外科,全军血管外科研究所 |
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| 摘 要： | 目的 构建携载人基质金属蛋白酶组织抑制剂 2 (hTIMP 2 )基因的重组腺病毒载体 ,为基因治疗提供实验基础。方法 利用基因重组技术将腺病毒骨架质粒 pAdEasy 1以及线性化的重组穿梭质粒 pTrack CMV hTIMP 2共转化BJ5 183受体菌并在其中发生同源重组 ,利用重组前后抗性的改变筛选出重组子 ,重组腺病毒质粒AdhTIMP 2经过 2 93细胞的包装 ,扩增和纯化后 ,测定病毒滴度。一步法提取细胞总RNA ,RT PCR检测hTIMP 2的mRNA。收集细胞上清 ,进行Western杂交检测TIMP 2蛋白。结果 得到了携带hTIMP 2基因的重组腺病毒 ,纯化后滴度为 4× 10 11pfu/ml,应用RT PCR和Westernblot方法 ,在转染 2 93细胞后 2 4h即可检测到hTIMP 2的表达。结论 成功地构建了携带hTIMP 2的重组腺病毒载体 ,为下一步的基因治疗提供了基础。
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| 关 键 词： | 基质金属蛋白酶组织抑制剂-2 基因重组 腺病毒载体 基因治疗 RT-PCR Western blot |
| 修稿时间： | 2002年11月17 |
The construction of adenovirus vector carrying human tissue inhibitor of metalloproteinase-2 gene |
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| ZHAO Xin,JING Zaiping,LIAO Mingfang,et al..The construction of adenovirus vector carrying human tissue inhibitor of metalloproteinase-2 gene[J].Journal of Interventional Radiology,2003,12(4):287-290. |
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| Authors: | ZHAO Xin JING Zaiping LIAO Mingfang |
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| Institution: | ZHAO Xin,JING Zaiping,LIAO Mingfang,et al. Department of Vascular Surgery,Changhai Hospital,The Second Military Medical University,Shanghai 200003,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tissue inhibitor of metalloproteinase Adenoviral vector Gene therapy |
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