心力衰竭气虚证动物模型的建立与评价

目的 建立心力衰竭气虚证的病证结合小鼠模型，并对其进行评价。方法 将44只昆明种（KM）小鼠随机分为假手术组、模型组、四君子汤加减组（12.89 g·kg^-1）。模型组及四君子汤加减组给予主动脉弓缩窄术（TAC）处理，假手术组只穿线不缩窄。采用超声心动图、病理学检测对心力衰竭进行疾病模型判断及药效学评估；从宏观表征、微观生物学、方剂反证3个层面分别对小鼠的一般性体征、体质量、旷场、抓力、线粒体超微结构等宏、微观表征进行采集，并测定线粒体分裂、融合蛋白表达，以判断证候类型。结果 TAC术后8周，相较于假手术组，模型组心脏左室射血分数（LVEF）显著降低（P<0.01），四君子汤加减可显著改善小鼠LVEF（P<0.05）。心脏苏木素-伊红（HE）染色结果显示，模型组出现炎性细胞浸润及血管壁增厚，四君子加减可显著改善炎性细胞浸润。在6~8周，相较于假手术组及四君子汤加减组，模型组小鼠出现显著的毛发不齐，毛发枯黄、活跃度降低及精神萎靡的情况。同时与假手术组比较，模型组体质量增长值明显降低（P<0.05）；与模型组比较，四君子汤加减组体质量增长值明显上升（P<0.05）。在6~8周，与假手术组比较，模型组旷场距离及旷场速度均明显下降（P<0.05），而四君子汤加减组在第8周明显改善旷场距离及旷场速度（P<0.05）。在6~8周，与假手术组比较，模型组抓力最大值明显下降（P<0.05），而四君子汤加减组TAC术后8周抓力最大值明显增加（P<0.05）。腓肠肌透射电镜显示，模型组肌组织基质不均匀，线粒体肿胀，体积变大，基质溶解，嵴缺失，空泡化；四君子汤加减组可改善线粒体肿胀，嵴断裂，基质空化。蛋白免疫印迹法（Western blot）结果显示，与假手术组比较，模型组小鼠腓肠肌分裂蛋白动力相关蛋白1（DRP1）表达显著增高（P<0.01），线粒体融合素1（MFN1）表达明显降低（P<0.05）。同时与模型组比较，四君子汤加减组小鼠腓肠肌分裂蛋白DRP1表达明显降低（P<0.05），MFN1表达显著升高（P<0.01）。结论 TAC术后小鼠6~8周出现显著的气虚证候表现，同时伴随腓肠肌线粒体形态功能异常，而四君子汤加减可显著改善这一过程。

Establishment and Evaluation of Heart Failure Model with Qi Deficiency Syndrome