泽兰提取物对慢性前列腺炎的治疗作用及调控炎性小体NLRP3信号通路的机制

目的 探讨泽兰提取物对慢性前列腺炎（CNP）的治疗作用，并基于炎性小体NOD样受体蛋白3（NLRP3）通路探讨其抗CNP的可能作用机制。方法 采用5 mg·L^-1脂多糖（LPS）诱导人正常前列腺基质细胞WPMY-1，通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测3.125、6.25、12.5、25、50、100 mg·L^-1泽兰提取物对LPS诱导WPMY-1细胞分泌IL-6含量的影响，并计算其半抑制浓度（IC₅₀）值。WPMY-1细胞给药50、75、100 mg·L^-1泽兰提取物后，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测NLRP3通路关键蛋白表达。应用角叉菜胶诱导法复制CNP大鼠模型。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠前列腺组织病理学变化；测定大鼠前列腺器官指数；ELISA检测大鼠血清5α-二氢睾酮（5α-DHT）及前列腺组织IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、环氧合酶-2（COX-2）、前列腺素E₂（PGE₂）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的含量；Western blot检测大鼠前列腺组织中COX-2、TGF-β₁及NLRP3通路关键蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠前列腺组织COX-2、白细胞介素-1β（IL-1β）、TGF-β₁、TNF-α mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组细胞分泌IL-6浓度显著升高（P<0.01）；细胞NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的蛋白表达水平明显升高（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，泽兰提取物对LPS诱导WPMY-1细胞分泌IL-6的IC₅₀为38.26 mg·L^-1；泽兰提取物低、中、高剂量组NLRP3、ASC和IL-1β蛋白表达水平明显下调（P<0.05，P<0.01），泽兰提取物中、高剂量组细胞Caspase-1蛋白表达水平明显下调（P<0.05，P<0.01）。与假手术组比较，模型组大鼠前列腺器官指数显著升高（P<0.01），前列腺组织大量炎细胞浸润，组织病理学评分明显升高（P<0.05），血清5α-DHT含量、前列腺组织TNF-α、PGE₂、IL-6、TGF-β₁、NOS₂/iNOS、COX-2含量，COX-2、IL-1β、TGF-β₁ mRNA表达水平明显升高（P<0.05，P<0.01），前列腺组织COX-2、TGF-β₁、NLRP3、Caspase-1、ASC及IL-1β蛋白表达水平明显上调（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，泽兰提取物低、高剂量均能有效减轻角叉菜胶所致的前列腺组织病理学改变，明显降低血清5α-DHT含量、前列腺组织TNF-α、PGE₂、TGF-β₁及iNOS含量（P<0.05，P<0.01）及COX-2、IL-1β、TGF-β₁ mRNA表达水平（P<0.05，P<0.01），明显下调前列腺组织COX-2、Caspase-1、ASC及NLRP3蛋白表达水平（P<0.05，P<0.01）。泽兰提取物低剂量组前列腺器官指数显著降低（P<0.01）。泽兰提取物高剂量组前列腺组织COX-2含量明显降低，TGF-β₁及IL-1β蛋白表达水平明显下调（P<0.05）。结论 泽兰提取物对CNP有明显的治疗作用并可能通过抑制炎性小体NLRP3信号通路的激活来减轻炎症反应。

Therapeutic Effect and Mechanism of Regulating Inflammasome NLRP3 Signaling Pathway of Lycopi Herba Extract on Chronic Prostatitis