| 上调RI对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞EMT及转移的影响 |
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| 引用本文： | 周宇箭,潘湘阳,陈俊霞.上调RI对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞EMT及转移的影响[J].基础医学与临床,2016(2):199-206. |
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| 作者姓名： | 周宇箭 潘湘阳 陈俊霞 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学基础医学实验教学中心,重庆,400016;2. 重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的研究核糖核酸酶抑制因子基因表达对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞EMT及转移的影响。方法构建RI真核表达质粒p IRES2-EGFP-RI,稳定转染B16-F10细胞。RT-PCR、Western blot和免疫荧光检测RI的表达;HE染色及相差显微镜观察细胞形态;FITC标记的鬼笔环肽染色,激光共聚焦观察细胞骨架;黏附实验、划痕实验和Transwell法检测细胞黏附、迁移和侵袭能力的变化;Western blot检测EMT及转移相关蛋白的表达;分别将各组B16-F10细胞眼眶静脉注射到c57/BL小鼠,建立肺转移动物模型,注射3周后处死小鼠。取肺称重,在解剖镜下计数肺转移结节数;肺组织切片HE染色观察肿瘤细胞转移;免疫组化检测肺转移瘤组织中转移及EMT相关蛋白的表达。结果 RI表达上调后,细胞由间质型向上皮型转换,细胞骨架重排;B16-F10-RI细胞组黏附、迁移和侵袭能力下降;与对照组相比,B16-F10-RI细胞中MMP2、MMP9、snail、slug、vimentin、twist和N-cadherin的表达明显降低,而E-cadherin,nm23-H1蛋白的表达明显增加(P0.01或P0.01)。实验组与对照组比小鼠肺的转移结节明显减少,同时EMT及转移相关蛋白在瘤组织中表达与体外细胞一致。结论上调核糖核酸酶抑制因子能够显著抑制B16-F10细胞EMT及侵袭、转移,RI可望作为治疗黑色素瘤的靶蛋白。
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| 关 键 词： | 核糖核酸酶抑制因子 EMT B16-F10细胞 转移 |
Effects of up-regulating RI on EMT and metastasis of mouse melanoma B16-F1O |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ribonuclease inhibitor EMT B16-F10 cells metastasis |
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