| 稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的卵巢癌OVCAR3细胞系的建立与鉴定 |
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| 引用本文： | 董梦梦,孙倩玲,张灵芝,黄梦庭,卢红艳,张佳乐,袁成福.稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的卵巢癌OVCAR3细胞系的建立与鉴定[J].基础医学与临床,2016(3):301-306. |
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| 作者姓名： | 董梦梦 孙倩玲 张灵芝 黄梦庭 卢红艳 张佳乐 袁成福 |
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| 作者单位： | 三峡大学医学院生物化学教研室,湖北宜昌,443002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，三峡大学人才启动基金，湖北省自然科学基金，大学生科技创新重点项目，三峡大学教学研究重点项目 |
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| 摘 要： | 目的建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的卵巢癌OVCAR3细胞系并研究CKS2敲除对卵巢癌OVCAR3细胞增殖的影响。方法根据siRNA的原理设计2对靶向CKS2的shRNA序列,构建慢病毒表达质粒(p LVTHM/CKS2 shRNA重组质粒);先用p LV-t TR/KRAB-Red空载体制备慢病毒并感染OVCAR3细胞;在此基础上再用p LVTHM/CKS2 shRNA重组质粒制备慢病毒并感染上述OVCAR3细胞;对上述两次慢病毒感染的OVCAR3细胞,用强力霉素(DOX)处理72 h后,用real time PCR及Western blot检测CKS2 mRNA及蛋白的表达;用MTT法检测细胞增殖。结果构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达质粒,包装出慢病毒并感染OVCAR3细胞;建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的OVCAR3细胞系,通过DOX诱导,可明显抑制该细胞系中CKS2在mRNA及蛋白水平的表达(P0.05,P0.01);CKS2敲除可明显抑制OVCAR3细胞的增殖。结论建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的OVCAR3细胞系,DOX诱导的CKS2敲除可明显抑制OVCAR3细胞增殖。
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| 关 键 词： | CKS2 可诱导型shRNA 卵巢癌 |
Establishment and identification of OVCAR3 cell line stably expressing inducible shRNA targeting CKS2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CKS2 Inducible shRNA Ovarian cancer |
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